• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        RAW264.7细胞株的传代

        互联网

        18800

        我养的是RAW264.7细胞株,前面有战友都提到过这种细胞的消化传代,但是因为这种细胞最大的特点是贴壁特别强, 每次传代都很难消化下来, 刚开始使用胰酶消化,发现37度, 消化15min细胞也还是吹不起来,后来又用单纯的用细胞刮刀刮的办法,但是这样养了一段时间,发现细胞损伤非常大,贴壁性变差,生长缓慢,后来使用了现在这个方法,到现在细胞的生长状况一直很好!

        简述如下:

        1) 将培养瓶内旧的培养液弃掉, 然后用D-Hanks液洗两次,(一定要洗干净,以免影响胰酶的消化作用)

        2) 加入0.25%胰酶-EDTA消化,25cm培养瓶加0.4ml, 37度消化5min,镜下看到细胞变圆,间隙增大。

        3)立即加含10%FCS的培养液终止消化,用细胞刮刀轻刮,注意,这时候用吸管吹不下来,但是刮刀却很容易刮下来,而且对细胞的损伤极小

        4)离心,弃上清,加新的培养液(10%FCS),小心吹匀,分装入新的培养瓶

        此法屡试不爽,细胞生长饱满圆润,再也没出现过以前那种情况。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序