实验问答22,272,540 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问请问各位老师同学这个pull-down结果怎么看呀。

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问肺炎链球菌溶血素诱导THP-1细胞凋亡涉及到哪些通路，可以通过检测哪些通路验证

loveliufudan

其中一个主要通路是NLRP3炎症小体信号通路，Pneumolysin会激活NLRP3炎症小体，导致Caspase-1的活化和炎症因子IL-1β、IL-18的释放。另一个涉及的通路是线粒体通路，Pneumolysin通过调节线粒体的膜电位、释放细胞色素C和激活Caspase-9，最终导致细胞凋亡。此外，Pneumolysin还可以激活JNK和p38 MAPK信号通路，通过调节Bcl-2家族蛋白的表达

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问MAPK经典激活途径与 p38 MAPK 有哪些相关靶点

loveliufudan

MAPK经典激活途径（MAPK cascade）是一种常见的信号转导途径，包括三个蛋白激酶级联反应：Raf-MEK-ERK。这个途径在细胞生长、增殖、分化、细胞周期调控等生理过程中起着重要的作用。与p38 MAPK相关的靶点有很多，它是一个多功能的蛋白激酶，在多种生理和病理过程中发挥作用。以下是一些与p38 MAPK相关的靶点：炎症反应：p38 MAPK参与多种炎症因子的调节，如TNF-α、IL-

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问肽图法能否检测作用的化学键

sswei

肽图可以确认或验证二硫键连接，以此得出蛋白质三级结构和疗效。

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问采用MSU诱导THP-1细胞2h的MAPK信号通路空白组P-P38值过高是什么原因呀

dxy_s6qz7bg9

您好，请问用MSU刺激细胞造模是用混悬液还是用氢氧化钠溶成溶液进行刺激呢？

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问WB显成这样是什么原因呢？回收的一抗能用多久？保存在四度还是-20度

z流沙z

首先看看有没有marker，初步判断转膜等步骤有没有问题，其次没有条带可能是由于目的蛋白表达低或者抗体不够了，最后一抗用个3-5次就差不多了，如果近期都会使用就放4°，不怎么用就放-20

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问请问大佬们谁知道特异性皮炎应该用什么细胞模型啊

dxy_rzi5hx48

请问您最后是怎么造的特异性皮炎的细胞模型呢？

4 回答1033 围观

问用神经系统特异表达Cre酶的工具鼠，给完药后取什么组织鉴定比较好？

sswei

用神经系统特异表达Cre酶的工具鼠，给完药后取血鉴定比较好，对小鼠影响最小。

3 回答332 围观

问人或小鼠源性的重组蛋白可以用于大鼠的实验吗？

z流沙z

查一下那个蛋白在大鼠、小鼠和人中的同源性，同源性高的话可能可以试用一下看看效果

3 回答1640 围观

问SOD测定，换算

loveliufudan

在测定SOD酶活力时，可以采用间接法，即通过测定其对抗氧化剂的能力来计算其活力单位。常用的抗氧化剂是巴比妥酸和硝酸钠。SOD的酶活力单位通常以U/mg蛋白计算。计算SOD酶活力单位时，您需要知道实验测量的光密度（OD），并使用标准曲线将其转换为巴比妥酸单位（U）。然后，您可以将巴比妥酸单位与反应混合物中的蛋白质含量（通常以mg/mL或μg/mL表示）相除，从而得到SOD酶活力单位（U/mg蛋白）。

2 回答1531 围观

问融合表达

土井挞克树

下图为GGGS的核酸蓄力，供你参考

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问细胞学实验结果分析求教

dxyc42u

排除实验操作问题，这种情况还是有可能的，万一你这个基因就只调节迁移这一个表型呢

4 回答343 围观

问配胶放的时候没有气泡，凝固了就有气泡，感觉是胶缩太多了而且随着时间越来越多，稍微降低了促凝剂的量，没有用。请问为什么?怎么解决？

是TTT

很奇怪也很少见估计是你配好胶加到板子里面之前没有摇匀，这一步需要震荡摇匀

4 回答488 围观

问ZDOCK蛋白蛋白对接结果分析，Pymol

飞鸟胖胖

可能因为你的两个蛋白的chain用了相同命名，如果一个是chain A，另一个就改成chain B

4 回答3346 围观

问AGS求助

z流沙z

首先要摸索一下细胞的药杀浓度，然后要确定一下病毒的滴度或者包装效果（比如荧光）

4 回答289 围观

问这是羟基红花黄色素A标准品，这种现象是属于肩峰还是拖尾，要怎样解决？

晴空a

原因可能为：① 筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子；② 存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子；改换流动相或更换选择性好的柱子；③ 可能柱超载，减少进样量。

3 回答554 围观

问样本上样一样，但曝片出的结果不一样，这是为什么

loveliufudan

可能有多种原因：试剂或设备问题：试剂可能存在批次差异，或者设备可能存在不稳定性，导致多次上样结果不一致。操作问题：即使上样量相同，但是上样的位置或者方式可能存在微小差异，也可能导致结果不同。数据处理问题：数据处理的过程中可能存在人为或者系统的误差，导致结果不同。针对这些问题，可以考虑以下解决方案：对试剂和设备进行检查和校准，确保它们的稳定性和一致性。在上样前，尽量保证操作的一致性，例如使用同一种样

3 回答165 围观

问WB结果出现目的蛋白很浅，但actin位点或者Gapdh位点出现很深的条带，什么原因呢

秋秋欣欣

有可能内参荧光太强会遮盖目的荧光

4 回答816 围观

问跑WB时，曝片出现以下情况

z流沙z

首先确定膜上是否有marker，有的话那可能是上样量不够或者抗体种属不对

3 回答423 围观

问求助原核表达蛋白诱导不出来

loveliufudan

可能导致蛋白质无法表达的原因可能是其他的问题，比如启动子或表达载体的问题、表达条件的问题、蛋白质的毒性等等。在原核表达中，稀有密码子过多也有可能会导致蛋白质表达不稳定或表达量较低。稀有密码子相对于常见密码子的供应量较少，因此在细胞翻译中，翻译速度可能会降低，蛋白质折叠可能会受到影响。因此，在原核表达中，尽可能使用常见密码子可以提高蛋白质的表达水平和稳定性。

3 回答1282 围观

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