WB样品没有条带？是怎么回事？

出现WB样品没有条带的情况可能有以下几种可能的原因：

蛋白质含量过低：WB的检测需要一定的蛋白质含量才能够进行，如果样品含量太低，则可能无法检测到条带。在样品制备时，可能需要增加样品量或调整蛋白提取条件，以获得足够的蛋白质含量。 

蛋白质迁移问题：WB的条带生成需要经过蛋白质电泳和膜上转移两个步骤，如果蛋白质没有完全迁移到膜上，则可能会导致条带不清晰或者没有条带。在蛋白质电泳过程中，需要确保电泳条件的稳定性，同时在转膜时需要注意膜的质量和转膜条件的优化。 

抗体问题：WB的检测需要使用特异性抗体，如果抗体不稳定或者特异性不好，则可能会导致条带不清晰或者没有条带。在选择抗体时，需要考虑抗体的质量和特异性，并且在使用抗体时需要严格控制条件以获得最佳的实验结果。 

其他问题：还有其他可能的问题可能会导致WB样品没有条带，例如蛋白样品的降解、缺少必要的试剂或设备、实验操作不当等等。需要根据具体情况进行分析和解决。

首先判断膜上面有没有marker，其次确定样品有没有问题是否降解，最好能有个阳性对照，最好确定一下抗体种属和稀释比例

有很多可能:

1.样品有没有降解呢，可以重新测一下浓度看看。

2.是不是上样时间太久样品弥散了呢，一般半个小时上样完成。

3.是不是转膜转反了，或者Western转膜液不行了，建议用新的试试。

4.是不是一抗失效了，建议配一管新的，抗体储存和配置比例详细看说明书。

5.是不是二抗失效了，或者一抗和二抗种属不一样。

6.是不是发光液失效了呢?配好的抗体和发光液都要避光4℃保存。

一抗和二抗的孵育浓度是否足够、检查抗体说明是否宿主来源是否对应、目标蛋白是否有效的转移到膜上，可以使用丽春红染膜，确认转膜效率、洗涤过渡、重复使用稀释过的抗体、二抗是否可以正常的工作、底物是否有效，电泳时正负极是否安装反了

胶片上一点信号都没有，多数情况是抗体加错了；如果中间出现了微弱的条带，可能原因是蛋白上样量太少，一抗浓度过低，ECL发光液稀释过高或失效。若转膜出现了失误，比如膜放反了，肯定白片

二抗对一抗的种属问题，或样品无目的蛋白的表达

可能有以下几种原因：

样品中蛋白质含量过低：在WB实验中，需要一定的蛋白质量才能够产生明显的条带，如果样品中的蛋白质含量过低，可能会导致没有条带出现。可以尝试使用更多的样品或者增加蛋白质浓度。

抗体不足或质量差：抗体是WB实验中的关键因素之一，如果抗体不足或质量差，可能会导致无法检测到目标蛋白质。可以尝试使用更高浓度的抗体或更换高质量的抗体。

蛋白质迁移不均匀：在蛋白质迁移的过程中，如果蛋白质没有均匀迁移到膜上，可能会导致某些部位没有条带出现。可以尝试增加电流或延长电泳时间，以确保蛋白质能够均匀迁移到膜上。

膜的质量不佳：使用质量不佳的膜可能会导致蛋白质迁移效率降低，从而出现没有条带的情况。可以尝试更换膜的品牌或者批次。

操作不当：操作过程中出现的问题，如电泳时间过长或过短、抗体的温度不合适等，可能会导致WB实验结果出现问题。可以检查操作过程中的细节，排除操作问题。

完全没有条带的原因主要有以下4点：

（1） 抗体加错（最常见一抗加错抗体，或二抗种属加错）。

（2） 转膜出现了问题（常见膜放反）。

（3） 发光液失效或不够灵敏。

（4） 蛋白上样量过少，一抗浓度太低。