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ITRAQ实验
服务介绍
iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)技术是由美国应用生物系统公司ABI研发的一种多肽体外标记技术。该技术采用4种或8种同位素的标签,通过特异性标记多肽的氨基基团,然后进行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量。
技术优势
1. 高通量,可同时对2-8种不同条件下的样品进行蛋白质差异分析。
2. 适合广泛样品类型:胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等。
3. 高灵敏度,iTRAQ质谱定量技术可检测到更多类型的蛋白质分子,如低丰度蛋白质、强酸(碱)性蛋白质、<10KD或>100KD的蛋白质分子。
客户提供
1. 蛋白质提取物(浓度 >1μg/μl,蛋白质总量 >300μg)
2. 细胞样品(细胞量>107)
3. 组织样品(动物、微生物组织湿重>10mg;植物鲜嫩组织>100mg)
4. 体液样品(血液体积>500μl)
最后交付
完整的实验报告包括试剂耗材,厂家货号,实验步骤及实验结果等
参考文献
1. Yang QS, Wu JH, et al. Quantitative proteomic analysis reveals that antioxidation mechanisms contribute to cold tolerance in plantain (Musa paradisiacal L.; ABB Group) seedlings. Mol Cell Proteomics. 2012; 11(12): 1853-69.
2. Xu C, Gao X, et al. The basal level ethylene response is important to the wall and endomembrane structure in the hypocotyl cells of etiolated arabidopsis seedlings. Mol Cell Proteomics. 2012; 54(7): 434-55.
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文献和实验is a subject of intense interest. We discuss three applications of isobaric tags for relative and absolute quantitation (iTRAQ) to the analysis of phosphopeptides from a variety of sample materials.
只有50或者60个。因为一些高丰度的蛋白会大量分部在上述的小孔中,抑制了其他蛋白的检出效果。2. iTRAQ技术区别与以往二维电泳技术,具有如下优势:2.1灵敏度很高,检测限较低,可检测出低丰度蛋白;2.2高通量:同时对4-8个样本进行分析,提高实验通量,可同时对多个时间点或不同处理的蛋白质进行分析;2.3分离能力强,分析范围广,iTRAQ可以对任何类型的蛋白质进行分离鉴定,包括高分子量蛋白质、酸性蛋白和碱性蛋白,膜蛋白和不溶性蛋白;2.4结果可靠:通过高度敏感性和精确性的串联质谱方法,不需要凝胶
行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。 iTRAQ技术特点: 不同样本标记之后混样,统一处理上机,减少了分别上机造成的实验误差,并利用同位素标签的丰度来检测,定量更准确,重复性更好; 由于需要标记试剂标记,因此成本相对较高; 通量高,在一次实验中最多可同时比较8个样品; 利用基于同一个参考样品的办法,可以进行多于8个样品的定量比较; iTRAQ的覆盖度高、灵敏度高。 Label-Free定量蛋白质组学分析 Label-Free定量,即非标记的定量
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