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- 免疫共沉淀Co-IP实验
- 2026年01月14日
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Co-IP实验
服务介绍
免疫共沉淀Co-IP(Co-immunoprecipitation)技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法， 其以细胞内源性靶蛋白为诱饵，将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育，形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物，然后将该复合物纯化后进行凝胶电泳分离蛋白，应用Western blot 或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。 免疫共沉淀最大的优势在于该体系是在生理条件下检测蛋白质之间的相互作用。
客户提供
1. 生长状态良好的细胞及细胞培养条件；
2. 实验设计方案（比如细胞的分组，药物处理的浓度及时间等实验信息）；
3. 免疫沉淀所用的IP级和WB级靶蛋白抗体，IP级和WB级结合蛋白抗体（若进行外源性免疫共沉淀实验，则需要提供过表达质粒）；
4. 确定是在293T工具细胞开展还是在客户目的细胞开展实验。
最后交付
完整的实验报告包括试剂耗材，厂家货号，实验步骤及实验结果等。
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文献和实验ELISA 是一个非常严谨、极其考验操作者技巧和经验的实验，检测结果数值低、标准曲线梯度差、背景值高、变异系数大等诸多问题也是兵家常事。 本文将常见的 ELISA 实验结果 OD 值偏低的原因及对策进行了汇总，具体如下！ 整体 OD 值偏低或无信号 标曲 OD 偏低但样本 OD 值正常 标曲线性佳但样本 OD 值偏低
整体 OD 值偏高 标曲 OD 值正常，样本 OD 值过高 标准品/样本复孔差异大 空白背景值高
，不能得到足够的菌量来抽提质粒，摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型，导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多：容易导致裂解不充分，且容易超过硅胶膜柱的承载上限，最终使得质粒提取效率降低，建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当：比如在加入缓冲液重悬菌体时，菌体没有充分分散悬浮，导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解，可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂（QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂），均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
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