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- 荧光素酶报告基因DLA实验
- 2026年01月13日
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荧光素酶报告基因DLA实验
服务介绍：
萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，其转录完成后就立刻生成功能性的萤光素酶；Dual-Luciferase®双萤光素酶报告基因检测系统采用同时表达萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶组成双荧光素酶报告基因实验系统（Dual-Luciferase Reporter Assay简称DLA），两者没有种源同源性并对应不同的反应底物，故而没有交叉干扰。本实验系统被广泛用于：转录因子/启动子luciferase报告基因研究和miRNA对靶基因调控研究。
客户提供
1. 转录因子/启动子luciferase报告基因研究：
a. 提供待研究的转录因子名称（如果有转录因子过表达质粒，可提供予我们）；
b. 提供预测的转录因子靶基因的启动子结合位点（如果有启动子荧光素酶报告基因质粒，可提供予我们）；
c. 确定是在目的细胞还是293工具细胞开展。
2. miRNA对靶基因调控研究：
a. 提供miRNA的mimics或者inhibitor；
b. 提供预测的miRNA靶基因的3-UTR结合位点（如果有转录因子过表达质粒，可提供给我们）；
c. 确定是在目的细胞还是293工具细胞开展。
最后交付
完整的实验报告包括实验试剂耗材，厂家货号，实验步骤及实验结果等；
参考文献：
1. Yang HM, Do HJ, Kim DK, Park JK, Chang WK, Chung HM, Choi SY, Kim JH.Transcriptional regulation of human Oct-4 by steroidogenic factor-1.J Cell Biochem. 2007;101(5):1198-1209.
2. Lorenz WW, McCann RO, Longiaru M, Cormier MJ.Isolation and expression of a cDNA encoding Renilla reniformis luciferase.Proc Natl Acad Sci U S A. 1991 May 15;88(10):4438-42.
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文献和实验在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ，通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不够便利。因为各自的测试化学，处理要求，检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统，结合pRL载体系统，表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶，在单管中进行双荧光素酶报告基因测试，快速，灵敏，简便。系统还提供PLB裂解液，用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞，不需操作单个样品
gene122 本人遗传学准研究生，现在在实验室，看到有报告基因实验，但是不知道这个实验的原理及目的，哪位好心人解释下 zhujoker 这个原理已经在这个版块讨论过了，自己学会搜索吧！ 下面链接有一些初步的介绍：http://www.biox.cn/content/20050411/10190.htm 3090547 多多自己动手 本文由丁香园论坛提供，想了解更多
zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题，未得其解，恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候，检测的是细胞因子的启动子。换句话说，是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内，通过刺进因素作用后，检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是，怎么通过使用内参的方法，去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为，个人认为，细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai
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