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基因点突变细胞定制

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  • CRISPR/Cas9细胞系定制
  • 上海
  • 2025年07月16日
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      上海派致生物科技有限公司

    • 服务名称

      基于CRISPR/Cas9技术基因点突变细胞系定制

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    基于CRISPR/Cas9技术基因点突变细胞系定制

    技术简介

          通过sgRNA引导Cas9核酸酶切割基因组目的序列导致DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSB),同时以包含点突变的同源序列为模版,通过同源重组修复Homology directed repairHDR)的方式对目的位点进行点突变,从而获得基因组DNA指定位点引入点突变的细胞系。

    技术优势

          经过多步优化的CRISPR/Cas9系统,适用于更广泛的哺乳动物细胞,提高了编辑率高,同时大大降低了脱靶效应。

    实验流程

    方案选择

    方案 优缺点 适用类型
    CRISPR同源重组 1、方法成熟稳定,无gRNA设计限制
    2、不适合难转染细胞
    1、编码基因外显子内点突变,不去荧光标记
    2、不能满足BE和PE系统设计规则的点突变
    3、细胞易转染
    Base Editor(BE)系统 1、效率高
    2、突变位点需在最适编辑窗内
    1、有点突变类型限制,适用较少部分满足条件的点突变
    2、难转染细胞
    Prime Editor(PE)系统 1、不受点突变类型限制
    2、不同细胞中效率有差异
    1、难转染细胞
    2、BE系统和CRISPR同源重组方法都不适用的情况
     

    服务标准

    客户提供:
    1. 目的基因ID及突变位点信息;
    2. 目的细胞(可选择由派致代购);
    3. 完全培养基1-2 L(派致提供DMEM1640常规培养基)。
    派致交付:按指定方案构建的细胞系及项目报告。
    交付周期:14-35周,具体时间取决于靶点复杂程度、细胞类型及生长情况。

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