
基因点突变细胞定制
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- CRISPR/Cas9细胞系定制
- 上海
- 2025年07月16日
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- 提供商:
上海派致生物科技有限公司
- 服务名称:
基于CRISPR/Cas9技术基因点突变细胞系定制
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基于CRISPR/Cas9技术基因点突变细胞系定制
技术简介
通过sgRNA引导Cas9核酸酶切割基因组目的序列导致DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSB),同时以包含点突变的同源序列为模版,通过同源重组修复(Homology directed repair,HDR)的方式对目的位点进行点突变,从而获得基因组DNA指定位点引入点突变的细胞系。技术优势
经过多步优化的CRISPR/Cas9系统,适用于更广泛的哺乳动物细胞,提高了编辑率高,同时大大降低了脱靶效应。实验流程
方案选择
| 方案 | 优缺点 | 适用类型 |
| CRISPR同源重组 | 1、方法成熟稳定,无gRNA设计限制 2、不适合难转染细胞 |
1、编码基因外显子内点突变,不去荧光标记 2、不能满足BE和PE系统设计规则的点突变 3、细胞易转染 |
| Base Editor(BE)系统 | 1、效率高 2、突变位点需在最适编辑窗内 |
1、有点突变类型限制,适用较少部分满足条件的点突变 2、难转染细胞 |
| Prime Editor(PE)系统 | 1、不受点突变类型限制 2、不同细胞中效率有差异 |
1、难转染细胞 2、BE系统和CRISPR同源重组方法都不适用的情况 |
服务标准
客户提供:1. 目的基因ID及突变位点信息;
2. 目的细胞(可选择由派致代购);
3. 完全培养基1-2 L(派致提供DMEM及1640常规培养基)。
派致交付:按指定方案构建的细胞系及项目报告。
交付周期:14-35周,具体时间取决于靶点复杂程度、细胞类型及生长情况。
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