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- 利用CRISPR/Cas9 SAM系统激活内源基因表达
- 上海
- 2025年07月15日
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上海派致生物科技有限公司
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基于CRISPR/Cas9 SAM系统的内源基因激活细胞系定制
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基于CRISPR/Cas9 SAM系统的内源基因激活细胞系定制
技术简介
基因过表达是研究基因功能的重要方法，传统过表达方法是通过外源启动子驱动外源目的基因的cDNA表达，该方法并不能很好的模拟基因转录时丰富的转录本，并且受到过表达载体的限制，无法过表达开放阅读框超过20kb的基因。基于CRISPR/dCas9的SAM系统，能够通过dCas9招募转录激活元件HSF、P65和VP64，从而实现高效的内源基因激活，该技术相比传统的cDNA过表达能够更好的还原基因在细胞水平的过表达状态。技术优势
1. 能够模拟内源基因丰富的转录本，实现多种转录本的共同过表达；2. 没有目的基因大小限制，可对任意大小的基因实现过表达；
3. 可以同时激活多个基因；
4. 通过慢病毒可实现内源基因的长效激活。
适用范围
1. 过表达目的基因较大，外源过表达效率低；2. 需要同时过表达目的基因的多个不同转录本；
3. 需要在同一个细胞内激活/过表达两个及以上的基因（该系统可同时激活2-10个目的基因）。
实验流程
载体信息
服务标准
客户提供：1. 需激活的目的基因ID；
2. 目的细胞（可选择由派致代购）；
3. 完全培养基1-2 L（派致提供DMEM及1640常规培养基）。
派致交付：按指定方案构建的细胞系及项目报告。
交付周期：10-24周，具体时间取决于靶点复杂程度、细胞类型及生长情况。
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