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Transwell小室底层的一张有通透性的膜(一般为聚碳酸酯膜),将其放置于24孔板或6孔板中,小室内称上室,培养板内称下室。由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞。应用Transwell可研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等方面的影响。
1. 肿瘤迁移实验:研究肿瘤细胞的迁移能力或特定情况下肿瘤细胞的迁移能力。常用8.0、12.0µm膜,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑,计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。
2. 肿瘤侵袭实验:研究肿瘤细胞的侵袭能力或特定情况下肿瘤细胞的侵袭能力。在聚碳酸酯膜上涂上一层基质胶,模仿细胞外基质,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,细胞要把基质消化后才可以从上室迁移到下室,计数进入下室的细胞量测定细胞的侵袭能力。
上海生博提供:根据客户要求对相应肿瘤细胞类型进行Transwell肿瘤迁移及侵袭实验。
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文献和实验使Matrigel聚合成凝胶...阅读全文 Transwell的其他应用的实验步骤 1.Transwell肿瘤细胞迁移实验过程与Transwell侵袭实验基本一致,不同的只是不需要铺Matrigel。个人认为,由于没有基质胶的阻挡,细胞穿过膜的速度较侵袭实验明显加快,所以细胞量要更大。我做侵袭实验的细胞密度是1×105,而迁移实验的密度是1×106。另外,下层培养液的FBS浓度也可适当下调,我做侵袭实验的浓度是5%,迁移实验的浓度是2.5%。2.Transwell上皮细胞培养步骤做了一段时间的原代
2.2.4.2 旋转摇动球体器官培养法 2.2.5 单层细胞侵袭实验模型 2.2.6 Transwell侵袭小室测定法可见,Transwell与侵袭实验之间并不能划等号,Transwell有多种应用,侵袭实验也有多种方法。所谓Transwell侵袭实验,其实是指 将Transwell这一技术应用于肿瘤细胞侵袭研究的一种实验。由于其简单易行、重复性好,因而得到了越来越广泛的应用,但不能认为研究肿瘤侵袭只有 Transwell一种方法
了才可以从低营养的培养液跑到高营养的培养液里面,最后我们检测高营养的培养液里细胞量就可以知道细胞的侵袭能力了。而迁移实验就是不铺胶直接让细胞穿过就行了。Transwell 简易图以下学霸君来介绍侵袭实验步骤:实验前准备:transwell 小室(一般选用 12um),24 孔板,基质胶(corning),细胞实验所需的基本的材料。基质胶铺板用 BD 公司的 Matrigel 1:8 稀释(可以直接用无血清的培养基稀释),包被 Transwell 小室底部膜的上室面,置 37℃孵箱 1-4h
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