北京现货多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京现货多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒促销是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京现货多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒促销
规格：10T
英文名：Multi One Step Cloning Kit
编号：SY0280
产地：国产|进口
本产品是一款简单、快速、高效的多片段DNA定向克隆产品，该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp～20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在重组酶Exnase的催化下，仅需反应30 min即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。

试剂盒中包含有针对多片段重组反应而优化的反应缓冲液和重组酶Exnase。使用该试剂盒，可以一次实现多至5个片段的顺序拼接克隆。Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。

该试剂盒可用于多片段拼接克隆、全基因合成和DNA定点突变。

产品组份：

5×CE Buffer——————40 μl
Exnase——————20μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl
Control insert Mix(0.5 kb, 10 ng/μl; 1 kb, 20 ng/μl; 2 kb, 40 ng/μl)————5μl

实验流程概览

1) 线性化克隆载体制备；
2) 插入片段扩增引物设计；
3) 插入片段PCR扩增；
4) 进行重组反应；
5) 反应产物转化、涂板；
6) 克隆鉴定.



北京现货多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·AR-GFP报告基因质粒
编号：SY0188
英文名称：AR GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
AR-GFP报告基因是用于检测AR转录活性水平为目的的报告基因。Androgen Receptor(AR)属于核受体超家族中的类固醇受体,通过介导雄激素的作用调控多种基因的表达。

AR-GFP报告基因主要用于检测细胞中Androgen 信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型研究等。

pGMAR-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个AR结合位点，可以高效地检测AR的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得AR-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM AR -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMAR-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·胞苷三磷酸溶液(100 mM)(CTP)
编号：SY0053
英文名称：CTP Solution(100 mM)
规格：1ml
CTP即Cytidine-5-triphosphate，中文名为胞苷三磷酸，可用于分子生物学中多种相关应用，如体外转录、RNA扩增，以及胆碱和乙醇胺的合成等。

本产品为纯度≥99%（HPLC）的CTP三*盐配制所得的无色透明水溶液， pH (25℃)= 7.0±0.1，浓度为100mM，且无DNase，RNase和磷酸酶污染。

英文别名：Cytidine-5-triphosphate,trisodiu*(代"m") salt
CAS：65-47-4 (acid form)
分子式：C9H13N3Na3O14P3
分子量：549.1（acid form: 483.15)
外观：无色透明溶液
纯度：≥99%(HPLC)
结构式：
储存条件：-20℃，有效期2年。


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·聚凝胺
编号：SY0605
英文名称：Polybrene (hexadimethrine bromide)
规格：500ul
聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染，慢病毒介导的基因转染，作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂（肝素拮抗剂），常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序，因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。

本产品为即用型溶液，粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液，并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1：2000稀释，依细胞种类不同稀释比例不同，具体查阅相关文献。
注：Polybrene对某些细胞（如末端分化的神经元，DC细胞）毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。

操作步骤(仅供参考，具体使用浓度请参考相关文献)

实验1：逆转录病毒感染（Retroviral Infection）
（1）重组逆转录病毒原液的制备：取5ml生长培养基（5%血清）加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后，吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
（2）待感染细胞的培养：100mm培养盘内加入10ml完全培养基，细胞密度为5×105/盘。
（3）病毒感染：细胞培养24h后，吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 （或将病毒原液稀释到2ml）感染细胞，polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37℃孵育3-6h。
（4）收集病毒颗粒：加入8ml完全培养基。感染3天后，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。

实验2：转染
（1）完全生长培养基培养细胞，培养细胞密度约50%；
（2）孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液，按如下操作制备混合液：①添加完全培养基（60mm培养皿2ml，100mm培养皿3ml），37℃预热；②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀；③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
（3）去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
（4）去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution（15%DMSO in 1X HBSS）轻轻盖住细胞（60mm培养皿3ml，100mm培养皿4ml）。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
（5）立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗，100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
（6）加入完全培养基到细胞中；
（7）稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期2年。


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·人β-淀粉样多肽 1-42
编号：SY0436
英文名称：Amyloid β Protein Fragment 1-42, human
规格：1mg
β-淀粉样多肽1-42具有神经元毒性，C端的10个*基酸残基33-42及17-21的5个*基酸残基具有高度的疏水性，构成了Aβ1-42的疏水区；28-42*基酸残基形成β-折叠构象的可能性较大，而9-21的*基酸残基也可能形成β-折叠的构象，而β-折叠的构象有利于Aβ1-42的聚集沉积而形成老年斑。

阿尔茨海默病(AD)是发生于老年期的一种以认知障碍和记忆能力损害为主的中枢神经系统原发性、退行性疾病，是老年性痴呆中最常见的类型。人β-淀粉样多肽在阿尔茨海默病患者的老年斑中能较早地有选择地沉积，它是各种原因诱发AD的共同途径，是AD形成和发展的关键因素。Aβ是由β前体蛋白(APP)通过蛋白酶解途径裂解成长度为39～43个*基酸的片段，被识别的主要的两个淀粉样多肽是淀粉样β-蛋白（1-40）（Aβ40）和淀粉样β蛋白（1-42）（Aβ42），均由APP被β-分泌酶和γ-分泌酶连续酶解产生的。

Amyloid β 1-42还可下调BCL-2水平并提高Bax水平。

英文别名：Amyloid β1-42
CAS ：107761-42-2
多肽序列：NH2-Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala-COOH (DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA)
分子式：C203H311N50O60S
分子量：4514.14
外观：白色粉末
纯度：＞95%
溶解性：水：冰醋酸=3:1（1mg/ml）
储存条件：-20℃

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