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- 百奥莱博
- BTN131126-OCS
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
940
- 英文名：
One-Stop Blunt-ended Cloning Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
低温运输，-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式平末端克隆试剂盒厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：一站式平末端克隆试剂盒厂家
产地：国产|进口
规格：20次
品牌：百奥莱博
基因片段用Pfu等DNA聚合酶扩增得到的产物为平末端，直接克隆比较困难。做T/A克隆时，需要在其末端添加单个碱基A。本试剂盒提供了在平端添加单个A所需的所有试剂，大大方便后续的T/A克隆及序列分析。
产品特点：
1.适用范围包括：由高保真 DNA聚合酶如 Pfu、Pwo 、DeepVent等扩增而来的PCR产物；一些限制性内切酶如 EcoRV 、SmaI等酶切产生的DNA片段；粘端DNA用DNA聚合酶补平后的片段。
2.可以在任何平末端DNA片段两端分别补上单个脱氧腺嘌呤 A，间接将PCR产物克隆到T载体上。
3. 操作快速，5分钟就可以完成 。
| 成份 | 规格 |
| ddH2O | 1mL |
| 平末端载体 | 20μl |
| 10×克隆Buffer | 0.5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
1.在离心管中加入下列溶液：
| 成份 | 用量 |
| DNA Fragment | 10ng |
| 10× Cloning Buffer | 5μL |
| 平末端载体 | 1μL |
| ddH2O | up to 50μL |
2. 72℃保温，5分钟。
3.产物回收或者 -20℃保存备用。
关于一站式平末端克隆试剂盒厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
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文献和实验一、Lighteningssembly Cloning Kit 传统克隆方法：引物设计合成、PCR、连入克隆载体、酶切获得插入片段，酶切获得线性载体，连接获得重组质粒。需酶切，引物设计受酶切位点限制；需连入克隆载体；步骤多，耗时长；效率低。 北京康碧泉公司代理的Gene-Foci试剂盒的克隆方法：引物设计合成、PCR获得插入片段，PCR或酶切获得线性载体，连接获得重组质粒。无需酶切，引物设计不受酶切位点限制；无需连入克隆载体；步骤少，速度快；高连接效率，高阳性克隆
，能够以模版为准切掉错配的碱基，因而得到的PCR产物多数是平末端，不能用T载体克隆。通常需用目的载体多克隆位点上的平末端单酶切位点，单酶切得到平末端的线性片断，直接连接PCR产物。这类酶得到的产物通常不能用TA克隆试剂盒。目前也有商业化的平末端PCR产物克隆试剂盒，不过较少用。平末端的连接效率低，通常需要高浓度的连接酶，较长的连接时间，合适的片断：载体比例，有的时候还需要调整反应体系的ATP浓度或者增加聚乙二醇（PEG2000），以得到较高的连接效率。许多厂家都有推出快速连接试剂盒
℃，而拓扑异构酶I则偏爱室温。这个室温是指22-23℃，应特别注意。很多时候我们实验室的室内温度并不满足条件。TOPO克隆得到的菌落可能不如TA克隆多，不过质量高，95%左右都是重组子。价格约为5748元/20次，时间就是金钱，这下体会到了吧。 如果你用的是高保真酶，你可以选择在PCR之后加A，或者你直接选择平端克隆试剂盒。由于载体会自连，所以平末端克隆的背景会很高。为了避免这个问题，Invitrogen开发了Zero Background(零背景)技术，用在TOPO载体上。这个技术
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