- ￥900 - 1480
- TIANGEN
- 中国
- VI201
- 2026年04月25日
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-20℃保存
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一年
- 供应商：
天根生化科技（北京）有限公司
- 规格：
10次/20次
| 规格： | 10次 | 产品价格： | ￥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 20次 | 产品价格： | ￥1480.0 |
EasyGeno 重组试剂盒基于DNA序列同源性进行片段重组，可快速将单个或多个片段定向克隆到任意载体中。精心设计的一管式预混试剂2×EasyGeno Assembly Mix可将线性化的载体和插入DNA片段在同源区域进行重组连接，得到无缺口的闭环质粒，继而直接转化感受态细胞并筛选克隆。该方案摆脱了酶切位点的限制，仅需通过PCR在插入DNA的两端加入线性化载体15 bp的一致性序列，即可实现目的片段定向重组进入载体。重组反应可在恒温条件下快速进行 (50℃处理 15 min)，并能保证所得阳性率在 95% 以上。本试剂盒还能够实现多目的片段同时定向重组进入载体以及高通量的载体构建。
■ 载体构建不受酶切位点限制
■ 15分钟实现片段和载体的重组
■ 效率是传统双酶切连接的 5-10 倍
■ 可实现 100 bp-15 kb片段构建进入载体
■ 可实现 1-5 个片段同时定向构建进入载体
8 kb 片段定向重组进入pUC19 载体
pUC19 载体经EcoRI 和HindIII 限制性内切酶线性化，插入片段与线性化载体间带有15 bp 的重叠序列。重组后转化感受态细胞。从平板中随机挑取菌落于LB 培养基中振荡培养，阳性克隆酶切产生8 kb 的目的带。提取各个菌株的质粒，并进行EcoRI 和HindIII 双酶切鉴定。
两个1 kb 片段串联重组进入pUC19 载体
pUC19 载体经EcoRI 和HindIII 限制性内切酶线性化，片段A 和片段B 及线性化载体间均带有15 bp 的重叠序列。重组后转化感受态细胞。从平板中随机挑取菌落进行菌落PCR 鉴定，阳性克隆在PCR 扩增后会获得约2 kb 的条带。
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- 内容
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文献和实验[1] Liu J, Jiao H, Yin X. Engineered human mesenchymal stem cells as new vaccine platform for COVID-19[J]. BioRxiv, 2020: 2020.06. 20.163030.
[2] Huang M E, Qin Y, Shang Y, et al. C-to-G editing generates double-strand breaks causing deletion, transversion and translocation[J]. Nature Cell Biology, 2024, 26(2): 294-304.
[3] Fan K, Ma Y, Chang Y, et al. Cloning and Functional Analysis of NtMYB9 in ‘Jinzhanyintai’of Narcissus tazetta var. chinensis[J]. Horticulturae, 2022, 8(6): 528.
毒力抗原（Vi抗原，Vi＝Virulence）Vi antigen
定位于革兰氏阴性细菌菌体抗原（ O抗原）外侧的易热抗原。一般认为与毒力有关，因此称为毒力抗原。与氯化铁起反应，可用电子显微镜证实其存在。一般认为毒力抗原由 N-乙酰氨基糖醛酸的聚合物组成，在血清学上可与其他表面抗原区别开来。毒力抗原在血清学上是一个组，如用噬菌体则可分成 80种类型。
♦ 适用范围：适用于快速提取植物组织细胞总RNA本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。♦ 储存事项：1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。♦ 产品介绍：独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
连接酶，反应10分钟。平滑末端连接：在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时，或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外，NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1：在25°C条件下，用1 unit（1:400稀释后取1 µl）T4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图
