PRM/MRM 靶标定量技术

质谱多反应监测( PRM/MRM)定量技术是通过选择目标蛋白质的定量代表性肽段，让质谱仅对这些肽段进行质谱信号采集，从而获取目标蛋白质定量信息的质谱技术。利用该技术既可实现样品中靶标物质的相对定量，又可通过合成同位素标准肽段，绘制标准曲线，实现蛋白质的绝对定量。

应用领域：
1.可应用于蛋白质/多肽标志物验证、蛋白质翻译后修饰的定性定量研究和蛋白质/多肽药代动力学、临床诊断、违禁药物检查、食品化妆品等工业质量控制、环境检测、农业植物学研究。

技术优点：
1.PRM/MRM技术是目前所有质谱检测方式中灵敏度、重现性和准确度最高的定量技术，定量范围可达到5个数量级，定量重现性CV<10%, 相对误差<15%。
2.与经典的Westernblot、ELISA 技术相比，不需要使用抗体，获得更为准确和重现的定量验证结果。
3.在一个小时检测时间内可同时实现50个蛋白质的定量检测。
4.PRM可直接检测二级所有离子，减少了子离子的挑选和优化过程。

可选仪器：
0QTRAP5500, QE, QE-Plus, QE-HF, Fusion, Lumos

分析流程：
样品经胰酶酶切后，在质谱检测
窗口中设置靶向检测列表，采用
PRM/MRM方法进行质谱数据采集。
定量数据采用Skyline软件处理。

样品要求:
蛋白提取物：≥50μg
细胞：≥10⁶
组织：动物组织≥1 mg,植物组织≥10 mg
体液：血清≥5μL，脑脊液≥10μL




参考文献：
1 Kim HJ, Lin, Lee HJ, Li M, Liebler DC. Quantitative profiling of protein tyrosine kinases in human cancer cell lines by multiplexed parallel reaction monitoring assays. Mol Cell Proteomics. 2015 Dec 2. pii: mcp.O115.056713.
2 Majovsky P, Naumann C, Lee CW, Lassowskat , Trujillo M, Dissmeyer N, Hoehenwarter W. Targeted proteomics analysis of protein degradation in plant signaling on an LTQ-Orbitrap mass spectrometer. J Proteome Res. 2014 Oct 3;13(10):4246-58.
3 Zhao Y, Jia W, Wang J, Ying W, Zhang Y, Qian X. Fragmentation and site-specific quantification of core fucosylated glycoprotein by multiple reaction monitoring-mass spectrometry. Anal Chem. 2011 Nov 15;83(22):8802-9.
4赵焱，应万涛，钱小红等. 质谱MRM技术在蛋白质组学研究中的应用. 生命的化学. 2008, 28(2):210-213