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RNase H

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  • Thermo scientific -fermentas
  • EN0201
  • 2025年11月05日
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      大量

    • - 热失活65°C, 10 min
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Reaction Buffer
    EN0201 100 u (5 u/µl) 1.00 ml EN0201
    EN0202 500 u (5 u/µl) 1.00 ml EN0202
    Applications

    • 第二链cDNA合成前除去mRNA (1)。
    • RT-PCR和qRT-PCR:第一链cDNA合成后除去RNA模板。
    • 通过与oligo(dT)杂交后除去mRNA中的poly(A)序列(2)。
    • 位点特异性切割RNA (3)。
    • 体外聚腺苷酸化反应产物研究(4)。
    说明
    Ribonuclease H (RNase H)可特异性降解RNA-DNA杂合体的RNA链,见图1。但是该酶却不能水解单链和双链DNA和RNA的磷酸二酯键。

    来源
    大肠杆菌MRE-600细胞。

    分子量
    18.4 kDa,单体。

    活性单位定义
    1个活性单位是指37°C、20分钟内催化产生1 nmol酸性可溶产物所需的酶量。

    酶活性分析混合物:20 mM Tris-HCl (pH 7.8), 40 mM KCl, 8 mM MgCl2 , 1 mM DTT, 24 µM�3 H]-poly(A)・poly(dT), 0.03 mg/ml BSA, 4% (v/v)甘油。


    保存缓冲液
    保存缓冲液组分:
    25 mM HEPES-KOH (pH 8.0), 50 mM KCl, 0.1 mM�DTA, 1 mM DTT, 0.1 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    10X 反应缓冲液
    200 mM Tris-HCl (pH 7.8), 400 mM KCl, 80 mM MgCl2 , 10 mM DTT。

    质量控制
    相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染。

    抑制与失活
    • 抑制剂:金属螯合剂、SH-封闭试剂。
    • 失活:65°C加热10分钟。


    图1。RNase H活性。

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