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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 10X Reaction Buffer | ||||
| EP0091 | 2.5 µg; 250 u (0.1 µg/µl); (10 u/µl) | 0.25 ml | EP0091 | |
| EP0092 | 10 µg; 1000 u (0.1 µg/µl); (10 u/µl) | 1.00 ml | EP0092 | |
| EP0094 | 50 µg; 5000 u (0.1 µg/µl); (10 u/µl) | 5 x 1.00 ml | EP0094 |
- Features
-
- 在所有已知的聚合酶中,具有最高的合成持续性和链置换活性。最长可合成70 kb长度的DNA片段(1)。
- 高准确性DNA合成(5)。
- 高产量扩增DNA,即使微量模板也能高效扩增。
- 扩增产物可直接用于下游应用,如PCR、限制酶切、SNP基因分型等。
- Applications
-
- 滚环复制(RCA) (6):定期制备DNA 模板(7)。
- 多重置换扩增(MDA) (8)。
- 全基因组非偏好性扩增(WGA),见图1:
一 DNA扩增,SNP (9)和STR (10)检测;
一 从单细胞(11, 12)、致病生物或宏基因组(13)中无细胞扩增DNA;
一 从滤纸的血迹标本(14)扩增DNA。 - 测序DNA模板制备。
- 蛋白引物介导的DNA扩增(15)。
- 锁式探针原位基因型分析(17)。
- 重组克隆(18)。
- 无细胞克隆致死性DNA (19)。
- RNA-primed DNA 扩增 (16)。
酶活性分析混合物:50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 10 mM MgCl2 , 1 mM DTT, 0.01 mg/ml lambda DNA/HindIII, 0.2 µM dCTP (含[3 H]-dCTP), 0.2 mM dATP, 0.2 mM dGTP, 0.2 mM dTTP.
50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM KCl, 0.5% (v/v) Nonidet P40, 0.5% (v/v) Tween 20和50% (v/v)甘油。
- 抑制剂:aphidicolin, N2 -(p-n -butylphenyl)-dGTP (BuPdGTP), 2-(p-n -butylanilino)-dATP (BuAdATP) (20)。
- 失活:65°C加热10分钟。
备注
根据Dean et al., 2002 (9)的流程,phi29 DNA Polymerase扩增100拷贝(0.33 ng)人类基因组DNA。计算放射性[alfa-3 3P]-dATP渗入DE-81可吸收形式,定量分析扩增的总DNA。不同染色体上基因的扩增效率通过实时PCR仪器(ABI 7700)检测。
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文献和实验otherwise. Multiply primed rolling circle amplification (MPRCA) and multiple displacement amplification (MDA) methods are based on the same principle. The DNA amplification is non-PCR based and uses Φ29 DNA polymerase and random hexamer primers for unbiased
We report a simple homogeneous fluorescence assay for quantification of DNA polymerase function in high throughput. The fluorescence signal is generated by the DNA polymerase triggering opening of a molecular beacon extension of the template
PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合
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