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- Thermo scientific -fermentas
- EN0551
- 2025年11月05日
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| Catalog# | Size, concentration | Certificate of Analysis | MSDS |
| EN0551 | 1 ml (2 mg/ml of RNase A, 500 u/ml of RNase T1) | EN0551 |
- Features
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- 高水平RNA降解。降解水平比单独使用RNase A或RNase T1高。
- RNase A无DNase活性，使用前无需热该混合物。
- Applications
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- 除去DNA抽提物中的RNA (2)。
- 除去重组蛋白抽提物中的RNA。
- 核糖核酸酶保护分析(2)，使用推荐如以下所述。
说明
RNase A/T1 Mix综合有RNase A和RNase T1的RNA降解活性。RNase �A可特异性水解RNA的C和U残基；RNase T1特异性水解RNA的G残基，见图1 (1)。
浓度
2 mg/ml (相当10000 u/ml (200 Kunitz u/ml)) RNase A;
5000 u/ml RNase T1。
5000 u/ml RNase T1。
来源
RNase A：牛胰腺。
RNase T1：大肠杆菌细胞，含有来源于米曲霉(Aspergillus oryzae )的克隆基因rntA 。
RNase T1：大肠杆菌细胞，含有来源于米曲霉(Aspergillus oryzae )的克隆基因rntA 。
RNase A活性单位定义
1个活性单位是指37°C (pH 5.0)条件下，酵母RNA溶液水解导致其260 nm波长吸光值增加1.0所需的酶量。
50 units大致相当于1 �Kunitz unit (3)。
RNase T1活性单位定义
1个活性单位是指37°C(pH 7.5)条件下，酵母RNA溶液水解15分钟使其260 nm波长吸光值增加1.0所需的酶量。
保存缓冲液
保存缓冲液组分：
50 mM Tris-HCl (pH 7.4)和50% (v/v)甘油。
50 mM Tris-HCl (pH 7.4)和50% (v/v)甘油。
质量控制
相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、蛋白酶污染。功能检测方法为质粒DNA纯化过程中的RNA降解。
抑制与失活
- 抑制剂：目前最有效的抑制剂是哺乳动物核糖核酸酶抑制剂，如Ribolock™ RNase Inhibitor (#EO0381)。其它抑制剂：尿苷2’,3’-环钒酸盐、5’-双磷酸腺苷3’-磷酸盐和5’-双磷酸腺苷2’-磷酸盐(2)、SDS、焦碳酸二乙酯（DEPC）、4 M异硫氰酸胍加上0.1M 2 -巯基乙醇、重金属离子等。
- 失活：加热不能使之失活，建议采用过柱法或苯酚/氯仿抽提除去该酶混合物。
图1。RNase A/T1混合活性。
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