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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 10X Reaction Buffer | ||||
| EP0081 | 300 u (10 u/µl) | 0.40 ml | EP0081 |
- Features
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- 很强的3’=>5’ 外切核酸酶活性,大约是Klenow Fragment的1000倍(1)。
- 在Fermentas公司所有限制酶缓冲液中都有活性。
- Applications
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- 除去残留的基因组DNA,纯化共价闭环的DNA分子。
- 长片段引物延伸反应 (1)。
- DNA 3’-末端标记 (1)。
- 定点突变位点的链延伸反应 (2)。
- DNA 5’-突出位点补平。
- 第二链cDNA合成 (3)。
- 原位检测凋亡相关DNA片段 (4)。
酶活性分析混合物:40 mM Tris-HCl (pH 7.5), 10 mM MgCl2 , 1 mM DTT, 0.1 mg/ml BSA, 0.33 mM各种dNTP, 0.4 MBq/ml [3 H]-dTTP, 0.5 mM碱性变性的牛胸腺DNA。
20 mM磷酸钾 (pH 7.4), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA和50% (v/v)甘油。
- 抑制剂:金属螯合剂、修饰试剂(无水醋酸和N-乙基顺丁烯二酰亚胺可使3’→5’ 外切核酸酶失活,但是不影响聚合酶活性)(5)。
- 失活:75°C加热10分钟。
备注
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文献和实验In Situ Labeling of DNA Breaks and Apoptosis by T7 DNA Polymerase
The native T7 DNA polymerase is a fast and highly processive enzyme that can be used for in situ detection of apoptosis and various types of DNA breaks. The technique is quick and simple, and was shown to label earlier stages
DNA Sequencing Using Sequenase Version 2.0 T7 DNA Polymerase
The dideoxy chain-termination method of DNA sequence analysis involves the synthesis of a DNA strand by enzymatic extension from a specific primer using a DNA polymerase (1 ). Several different enzymes are available for this purpose, each having
mRNA Amplification with T7 RNA Polymerase
on ice. Second-strand cDNA synthesis Set PCR machine to hold at 16ºC. On ice prepare 2nd Strand Master Mix (per sample): 63 µL Nuclease-free H2O 10 µL 10x 2nd strand buffer 4 µL dNTP mix 2 µL DNA polymerase 1 µL
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