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Collagenase D
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500mg
胶原酶D
Collagenase D
from Clostridium histolyticum
General description
胶原酶D是通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干而从溶组织梭菌的培养物中制备的。
Specificity
胶原酶可降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。
Application
来自溶组织梭菌的胶原酶被广泛用于解聚多种类型的组织(如,肺、心脏、肌肉、骨骼、脂肪组织、肝脏、肾脏、软骨、乳腺、胎盘、血管、脑、肿瘤),以及用于建立原代细胞培养系统的单细胞悬浮液的制备。当细胞表面蛋白的功能性和完整性很重要时,推荐使用胶原酶D。来自Roche的
梭菌胶原酶已用于从多种类型的组织中进行细胞的制备,如肝细胞、脂肪细胞、胰岛、上皮细胞、肌肉细胞、内皮细胞等。 然而,应根据经验确定每个批次的酶对破坏特定组织的适用性。
Features and Benefits
内含物
冻干粉,未灭菌
Unit Definition
来自Roche的胶原酶以Wünsch单位(在+25°C下每分钟用Wünsch底物形成μmol的产物)进行测定。
通常,胶原酶活性是以Mandl单位(在+37℃下5小时内从胶原释放的1 μmol亮氨酸)给出的。
不幸的是,两个活性单位之间没有统一的转换因子,因为Mandl单位部分取决于胶原酶制剂中污染性蛋白酶的浓度,而这是一个不确定的变量。较纯的胶原酶制剂相对于粗制剂在Mandl单位中实际上具有更低的比活性。梭菌制剂通常具有约1:1800的转换因子(如某个特定批次的梭菌胶原酶所含有的约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
| 11088866001 | Collagenase D, 500mg,胶原酶D |
| 11088831001 | Collagenase B, 2.5g, non-steri,胶原酶B |
| 4476115001 | siRNA Transfection Reagent, 5x,siRNA转染试剂 |
| 11418033001 | Trypsin,Sequencing grd.,modifi,胰蛋白酶,测序GRD,修饰 |
| 11088815001 | Collagenase B, 500mg,胶原酶B |
| 10103586001 | Collagenase A, 500mg,胶原酶A |
| 11814443001 | FuGENE 6 Transf. Reag., 1 ml,转染试剂 |
| 11088793001 | Collagenase A, 2.5g, non-steri,胶原酶A |
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文献和实验丁香园网友yuanjianmei的问题为:胶原酶2一定要用D-hank's液配制吗?消化血管细胞一次要用多少啊?丁香园网友张艳红的观点为:用D-hank's液配制也可,但不一定。我做的是软骨细胞的原代培养,用的是1640完全培养基配制的。你消化血管细胞如果是做原代培养,我估计用6-8ml就可。我用时每次用8-10ml。当然,这也得视取用的组织特性和组织的量而定。仅供参考。丁香园网友wwj_5265994的观点为:不一定,我用PBS配的,我做的也是软骨细胞原代培养,用PBS配的,消化效果很好
研究中分离的特定组织,需要根据经验来选择合适的胶原酶产品,并对酶浓度、酶体积、酶作用时间进行摸索,才能找到最佳的消化方案。 罗氏胶原酶产品选择示例 罗氏胶原酶产品提取自溶组织梭状芽孢杆菌(Clostridium histolyticum),并根据不同的酶活和验证的功能应用分为Collagenase A/B/D/P/H五类产品。被广泛应用于各种组织中(如肺、心脏、肌肉、骨、脂肪组织、肝、肾、软骨、乳腺、胎盘、血管、脑组织和肿瘤组织等)单个细胞的分离。应用其获得的细胞产量、活度和细胞功能性均
Purification of a Membrane Protein (Ca2+/Mg2+-ATPase) and Its Reconstitution into Lipid Vesicles
by conventional dialysis, but it is reported that Extracti-Gel D™ (Pierce, Rockford, IL), when used in the form of a column, will remove such detergents from protein samples (3 ).
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