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- Thermo scientific -fermentas
- EN0321
- 2025年11月04日
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 5X Reaction Buffer | ||||
| EN0321 | 10,000 u (100 u/µl) | 2 x 1.00 ml | EN0321 |
- Applications
-
- 除去DNA片段中的单链突出末端(2)。
- S1转录图谱绘制(3, 4)。
- 发夹环结构切割。
- 在Exonuclease III协同作用下，制备定向缺失DNA片段(5)。
说明
S1 Nuclease降解单链核酸，释放具有5’-磷酰基的单核苷酸或寡核苷酸，见图1。该酶对DNA模板的活性是RNA模板的5倍(1)。Nuclease S1也能切割dsDNA的单链区域(切口、缺口、错配或环状结构引起)。
该酶还具有3’-磷酸单酯酶活性。 该酶是一种糖蛋白，糖类比例为18%。
来源
米曲霉(Aspergillus oryzae )。
分子量
29 kDa，单体。
活性单位定义
1个活性单位是指在37°C、1分钟内产生1 �μg酸性可溶的脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
酶活性分析混合物：30 mM sodium acetate (pH 4.5), 50 mM NaCl, 0.1 mM ZnCl2 , 5% (v/v) 甘油, 800 �μg/ml热变性的牛胸腺DNA。
保存缓冲液
保存缓冲液组分：
20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM NaCl, 0.1 mM ZnCl2 和50% (v/v)甘油。
20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM NaCl, 0.1 mM ZnCl2 和50% (v/v)甘油。
5X 反应缓冲液
200 mM醋酸钠(pH 4.5, 25°C), 1.5 M NaCl, 10 mM ZnSO4 。
质量控制
相关测试表明无双链DNA特异性核酸酶活性污染。功能测试为定向缺失DNA片段的制备(与Exonuclease III协同作用)。
抑制与失活
- 抑制剂：金属螯合剂、PPi , Pi 、5’-核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸。
- 失活：加入EDTA，70°C加热10分钟。
备注
当酶浓度过高或盐浓度过低时，S1 Nuclease会引起双链DNA、RNA和DNA/RNA杂合体断裂(6)。
图1。Nuclease S1活性。
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