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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 10X Reaction Buffer | ||||
| EN0191 | 4000 u (200 u/µl) | 0.20 ml | EN0191 |
- Features
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- 在Fermentas公司所有的限制酶缓冲液中均有活性。
- Applications
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- 与S1 Nuclease协同作用,制备具有单向缺失的DNA片段(2, 3)。
- 产生双脱氧DNA测序用单链模板(4)。
- 位点特异性突变(5)。
- PCR产物克隆(6)。
- 制备链特异性探针。
- 3’→5’外切脱氧核糖核酸酶活性,尤其适合双链:
ExoIII降解dsDNA的平末端、5’ -突出末端或切口,从DNA链的3’-端释放5’-单磷酸核苷酸,产生单链DNA片段,见图 1。该酶对具有3’-突出末端(至少有4个碱基,且具有3’-末端C残基)的DNA (1)、单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。 - 3’-磷酸酶活性:
ExoIII切除3’-末端的磷酸基团,产生3’-OH基团。 - RNase H活性:
ExoIII外切核酸酶活性,降解RNA-DNA杂合体中的RNA链。 - 脱嘌呤/脱嘧啶-内切核酸酶活性:
ExoIII切割脱嘌呤或脱嘧啶位点的磷酸二酯键,产生5’-端无碱基的脱氧核糖5’-磷酸残基。
酶活性分析混合物:50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 5 mM MgCl2 , 1 mM DTT, 0.05 mM超声破碎的E.coli [3 H]-DNA。
50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mM DTT和50% (v/v)甘油。
- 抑制剂:金属螯合剂、对氯汞基苯甲酸盐(0.1 mM浓度时,抑制效率达50-90%) (7)。
- 失活:70°C加热10分钟。
备注
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文献和实验Footprinting with Exonuclease III
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