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- YDJ236
- 2025年07月16日
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参考说明书
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参考说明书
- 英文名：
参考说明书
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大量
- 供应商：
上海羽朵
- 规格：
20次
（中文版）
主要用途
通用型线粒体DNA片段常见缺失（CD4977）定性分析试剂是一种旨在运用巢式聚合酶链扩增反应体系，针对各种线粒体DNA模板目标区域8224至13591碱基进行扩增，以定性分析常见缺失型扩增产物的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。广泛应用于肿瘤、衰老等研究。产品即到即用，性能稳定，无核酶污染，操作便捷，敏感高效，重复性强。
技术背景
线粒体是母系遗传的细胞器，进行氧化磷酸化产生ATP，提供能量于细胞。每个线粒体拥有其独有的基因组，即线粒体DNA（mtDNA），裸露的双链环状DNA分子，约16.6kb碱基，编码13个主要的线粒体复合物亚体。线粒体基因组不含有内显子和有效的修复系统，容易发生突变，容易被氧化损伤。体细胞线粒体DNA突变与衰老、心血管疾病、肿瘤等密切相关。其中最为常见的突变是位于线粒体基因图谱中8470至13446碱基位点之间的4977碱基片段缺失（ΔmtDNA4977），称为常见缺失（common deletion；CD4977），成为自然衰老的分子标记。使用巢式聚合酶链扩增反应体系，针对目标区域8224至13591碱基，采用外侧引物对和内侧引物对，正常线粒体基因组DNA可以获得5367碱基片段产物，而常见缺失型（CD4977）线粒体基因组DNA产生250碱基片段产物。通过使用较短的延伸时间（extending time），野生型5366碱基片段产物无法产生，唯一获得常见缺失型扩增产物。
产品内容
外扩液（Reagent A） 微升
内扩液（Reagent B） 微升
补充液（Reagent C） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里；有效保证6月
用户自备
PCR级矿物油：用于封隔反应液
PCR仪：用于样品扩增
PCR管或平板：用于PCR反应的容器
琼脂糖凝胶电泳：用于扩增后电泳分析
详细实验步骤请咨询客服！
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文献和实验1. 解离前取样、运输、储存注意事项 组织解离成功与否很大程度上取决于样本质量。不同的来源、取样方式、运输和储存条件可能会得到有明显差异的解离效果。一般建议取新鲜组织样本，取样过程尽量快速操作，避开坏死区域，低温保存在适宜的溶液中或短暂时间内进行解离实验，以保证足够好的细胞状态。 对于一些重要组织，当不能取样后立即进行下游解离时，需要将组织暂时储存，避免细胞坏死和凋亡，并防止细胞激活和细胞多能性的变化，以保持细胞的正常生理功能状态。常见的方法是冻存组织样本，但是在解冻后常常会导致大量细胞
Louhelainen以及英国利兹大学的生殖专家David Miller表示，这是“到目前为止关于开膛手杰克谋杀案的最系统且最先进的遗传分析”。研究人员提取并扩增了披肩上的DNA。他们将来自披肩的线粒体DNA片段与受害人Eddowes和嫌疑人Kosminski后代的线粒体DNA片段进行比较。他们发现，披肩上的DNA片段与Kosminski的后代相匹配。分析还表明，凶手是一名有着棕色头发和棕色眼睛的男子，这与目击者的描述相一致。“这些特征肯定不是唯一的，”作者在文章中承认。不过他们指出，在英格兰，棕色眼睛不如蓝色眼睛
化的产品。常见的细胞裂解液有 NP40、Triton X-100、RIPA buffer 等。下表是根据目的蛋白的不同定位选择裂解液的建议。虽然裂解液的使用范围比较广泛，能够满足总蛋白的提取，但是无法做到特异蛋白的提取，特别是遇到低丰度蛋白或者活性蛋白功能分析时，通用型的裂解液存在很大的局限性。 样品类型 裂解液（Sigma-Aldrich） 全细胞 NP-40
