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参考说明书
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参考说明书
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参考说明书
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大量
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上海羽朵
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20次
(中文版)
主要用途
通用型线粒体DNA损伤超长延展定量PCR扩增分析试剂是一种旨在运用rTth聚合酶XL进行超长延展PCR扩增,产生8.9kb线粒体DNA目标片段,根据产物量值的差异,来定量分析线粒体DNA损伤程度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。广泛应用于肿瘤、衰老、毒理作用、DNA修复等研究。产品即到即用,性能稳定,无核酶污染,操作便捷,敏感高效,重复性强。
技术背景
线粒体是母系遗传的细胞器,进行氧化磷酸化产生ATP,提供能量于细胞。每个线粒体拥有其独有的基因组,即线粒体DNA(mtDNA),裸露的双链环状DNA分子,约16.6kb碱基,编码13个主要的线粒体复合物亚体。线粒体基因组不含有内显子和有效的修复系统,容易发生突变,容易被氧化损伤。体细胞线粒体DNA突变与衰老、心血管疾病、肿瘤等密切相关。线粒体DNA损伤,包括氧化损伤,例如单链DNA断裂、双链DNA断裂、无嘌呤核酸位点(apurinic site)、碱基变异等,都将阻止聚合酶(polymerase)的作用,导致DNA片段扩增失败,由此产生扩增产物与DNA损伤程度的反比量值关系。基于这一原理,使用超长延展PCR扩增(Long Extension PCR; LX PCR)技术,在rTth聚合酶XL的帮助下,由线粒体基因组模板扩增出8.9kb碱基的大片段产物,通过ND1基因小片段扩增产物(108bp)拷贝数的标化处理,定量分析样品的扩增效率,来评价DNA损伤程度。
产品内容
外扩液(Reagent A) 微升
内扩液(Reagent B) 微升
补充液(Reagent C) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;有效保证6月
用户自备
PCR级矿物油:用于封隔反应液
实时定量PCR仪:用于样品扩增
PCR管或平板:用于PCR反应的容器
琼脂糖凝胶电泳:用于扩增后电泳分析
详细实验步骤请咨询客服!
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