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线粒体膜电位检测(JC-1)
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凯基生物
| 线粒体膜电位检测(JC-1) | |
| 实验目的:通过检测线粒体膜电位变化鉴定样品的凋亡情况 实验原理:JC-1为阳离子脂质荧光染料,有单体和多聚体两种存在状态,两者的发射光谱不同。正常健康线粒体的膜电位(△y)具有极性,JC-1依赖于△y的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内,发绿色荧光。 实验仪器:涡旋仪、低温高速离心机、流式细胞仪、荧光显微镜等 实验内容与方法:1.收集细胞并用PBS清洗两遍 2.加入 JC-1工作液孵育 3.荧光显微镜观察或流式细胞仪分析 客户提供实验信息: 1、实验信息(客户提供):样品信息 (样品全称、来源等) 2、实验材料提供 (1)样本材料:新鲜细胞不少于2×105至1×106个 (2)试剂:采用凯基生物细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1) 服务周期:1周以内(具体视样品数而定) 结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。 实验范例: |
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文献和实验一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体
yy59410 请问,我现在要测线粒体膜通透性改变即JC-1的检测,想问下国产的试剂盒里凯基的好还是碧云天的好。希望高手指路啊。 freecell 效果差不多。 yy59410 谢谢! 还有一个就是我用JC-1测MMP,是不是没必要再用罗丹明测ROS了! 我做的是凋亡检测! wudonghui3516010 我现在也是在用JC-1,效果
rhodamine methyl ester(TMRM)等可结合到线粒体基质,其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。 一、方法将正常培养的细胞和诱导凋亡的细胞加入使用终浓度为Rhodamine 123(1mM)或终浓度为DiOC6(25nM),JC-1(1mM),TMRM(100nM),37°C平衡30min,流式细胞计检测细胞的荧光强度。 二、注意事项1、始终保持平衡染液中pH值的一致性,因为pH值的变化将影响膜电位。 2、与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白,他们将与部分染料结合,降低
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