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Annexin V-FITC/EGFP/PE/APC检测
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凯基生物
| Annexin V-FITC/EGFP/PE/APC检测 | |
| 实验目的:通过带荧光标记的Annexin V检测各个样品的凋亡情况。 实验原理:细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。Annexin V是一种易于结合到磷脂类如PS的蛋白,可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此,可建立一种用Annexin V结合在细胞膜表面作为凋亡的指示并结合一种染料(如PI、DAPI、7-AAD等)排除试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。 实验仪器:低温高速离心机、流式细胞仪、孵育箱、荧光显微镜等 实验内容与方法: 1.收集细胞,洗涤、悬浮细胞; 2.加Annexin V-EGFP(或其它)及PI(或其它)混匀,避光、反应; 3.荧光显微镜、激光共聚焦或流式细胞仪观察和检测。 客户提供实验信息: 1、实验信息(客户提供): 样品信息 (包括来源、全称等) 2、实验材料提供 (1)样本材料 新鲜或冷冻细胞不少于2×105个 (2)试剂: 采用凯基生物自产的Annexin V-EGFP/EGFP/PE/APC细胞凋亡检测试剂盒等。或可按客户要求代订和使用其它品牌公司试剂。 服务周期:1周以内(具体视样品数而定) 正常A549细胞Annexin V-FITC/PI双染 A549细胞经双·氧水诱导Annexin V-FITC/PC双染 荧光显微镜观察 正常A549爬片Annexin V-FITC/DAPI双染 549经双·氧水诱导爬片Annexin V-FITC/DAPI双染 正常A549爬片Annexin V-FITC/DAPI双染 549经双·氧水诱导爬片Annexin V-FITC/DAPI双染 结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。 实验范例: 流式细胞仪检测 |
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文献和实验产品名称 规格 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I 100tests 产品组成成分: Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E) Annexin V-FITC (51-65874X
择? A:第一步考虑流式细胞仪配置,第二步考虑细胞自发荧光。对于本身有荧光的细胞(如转染了荧光蛋白基因的细胞或者药物孵育的细胞),特别是培养时间久或药物处理的细胞,一定要注意细胞代谢物和药物的荧光。一般来说,细胞代谢物的荧光会干扰 FITC/PE,所以建议用 Annexin V-APC,药物的干扰可查看药物本身的发射光谱是否会对检测选择的染料有影响。 Annexin V-APC 与 7-AAD 两种染料之间补偿干扰很小,染色操作简单,实验准确。 7-AAD 染料相比于 PI 染料粘稠度小,可减少检测
V-FITC(Cat. No. 65874X) PI(Cat. No. 66211E) Annexin V-PE(Cat. No. 65875X) 7-AAD(Cat. No. 34321X) 实验设备 1. 一次性12×75mm Falcon试管。 2. 微量加样器和加样头。 3. FACS流式细胞仪:上样检测。 4. CELLQuest软件
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









