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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称:
Caspase系列单项检测
- 提供商:
凯基生物
| Caspase系列单项检测 | |
| 实验目的:通过caspase活性检测鉴定样本的凋亡情况 实验原理:将caspase序列特异性的多肽底物偶联至发色基团,当该底物被Caspase剪切后, 发色基团即游离出来,可通过酶标仪或分光光度计测定其吸光值,考察caspase的活化程度。 实验仪器:低温高速离心机、酶标仪、孵育箱等 实验内容与方法: 1.提取样品蛋白并定量 2.加入Caspase Substrate避光孵育 3.酶标仪测定吸光值 4.计算caspase活性 客户提供实验信息: 1、实验信息(客户提供): 样品信息 (包括来源等) 指标名称 2、实验材料提供 (1)样本材料: 新鲜或冷冻细胞不少于5×105个,新鲜或冷冻组织样本不少于50 mg (2)试剂: 采用凯基生物自产caspase分光光度法检测试剂盒。 或可按客户要求代订和使用其它品牌公司试剂。 服务周期:2周至3周(具体视样品数而定) 结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。 |
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文献和实验一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
bin1986 最近在做凋亡,在用凯基的caspase-3分光光度法试剂盒检测 细胞经过与药物孵育24小时后检测 用酶标仪检测,OD值在0.1-0.3之间,有一定浓度依赖,高浓度下caspase-3的活化程度有差不多4 问题在于,我用BCA蛋白定量得到的蛋白浓度时30多ug/ul,我加了有250ug,如果按照说明书的话,这个OD值应该在1左右,而我的最高才0.3.另外我的control孔(没加药)与我最低
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。1、Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化
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