RIPA组织/细胞裂解液

RIPA 组织/ 细胞裂解液使用
RIPA 组织/ 细胞裂解液使用说明书
货号：R0020
规格：100ml
本产品配有一支 PMSF（100mM，1.5ml）
保存：RIPA 裂解液 4℃保存，PMSF -20℃保存。
产品简介：RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜（包括核膜） 。本试剂提取的蛋白为可溶
性总蛋白。




使用说明：
如发现 RIPA 有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量， 取每 1ml RIPA 加入 10ul PMSF， 使 PMSF 的终浓度为 1mM。 混匀备用 （PMSF 现用现加） 。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入
150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250ul裂解液的比例加入裂解液，用手
指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 5-10×10 5 细
胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250ul 裂解液的比例加入裂解液
(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量) 。
用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、Western 和免疫沉淀等操
作。
注意事项：
1、 使用本裂解液可以裂解细胞核，释放出核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘
稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液煮沸再离心，离心后直接上样电泳；若想测定浓度，可入加少量 SDS
（1%） ，煮沸后离心测浓度。
2、 本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒，请
选择 BCA 法或者 Lowry 法检测蛋白浓度。
3、 如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清
用于后续实验。



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PC0030 Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒


参考文献：
《Liraglutide reduces hepatic glucolipotoxicity?induced liver cell apoptosis through NRF2 signaling in Zucker diabetic fatty rats》 作者:Jun Guo，Cai Li，Chunxiao Yang，Bing Li，Jie Wei，Yajun Lin，Peng Ye，Gang Hu，Jian Li 期刊:Molecular Medicine Reports 影响因子:1.851 PMID:29693190
《Gecko Active Components Regulates Endoplasmic Reticulum Stress to Induce the Apoptosis of KYSE150 Cells through PERK Pathway》 作者:Yimeng Duan, Lengxin Duan, Zeyue Huang, Bingbing Wang, Jiangang Wang 期刊:Journal of Biosciences and Life Sciences 影响因子:0.552 PMID:
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang, Ruo‐Lun Wei, Wei Du, Li‐Wei Zhang, Tao Du, Ya‐Dong Geng, Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影响因子:4.458 PMID:30924320
《Glutamine Enhances the Hypoglycemic Effect of Insulin in L6 Cells via Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K)/Protein Kinase B (AKT)/Glucose Transporter 4 (GLUT4) Signaling Pathway》 作者:Caijuan Wang, Yujiao Deng, Yenan Yue, Wenting Chen, Yu Zhang, Guifang Shi, and Zhongming Wu 期刊:Medical Science Monitor 影响因子:1.98 PMID:29491345
《Sphingomyelin synthase 2 promotes H2O2-induced endothelial dysfunction by activating the Wnt/β-catenin signaling pathway》 作者:Panpan Zhang,Lingyue Hua,Huan Hou, Xingyue Du,Zhiqiang He, Menghan Liu, Xiaojuan Hu, Nianlong Yan 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:30272329
《Downregulation of transcription factor EB inhibits the growth and metastasis of colorectal carcinomas》 作者:Jin-Zhe Chang,Shu-Dong Chen,Hui Zheng,Hua-Ping Zhang 期刊:European Journal of Inflammation 影响因子:0.733 PMID:
《Stem cells from human exfoliated deciduous teeth ameliorate type II diabetic mellitus in Goto-Kakizaki rats》 作者:Nanquan Rao, Xiaotong Wang, Yue Zhai, Jingzhi Li, Jing Xie, Yuming Zhao and Lihong Ge 期刊:Diabetology & Metabolic Syndrome 影响因子:2.361 PMID:30858895
《Eicosapentaenoic acid-containing phosphatidylcholine promotes osteogenesis:mechanism of up-regulating Runx2 and ERK-mediated phosphorylation of PPARγ at serine 112》 作者:Lei Mao，Meiling Wang，Yuanyuan Li，Yaxuan Liu，Jingfeng Wang，Changhu Xue 期刊:Journal of Functional Foods 影响因子:3.197 PMID: