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- 安必奇拥有成熟的稳定细胞系构建平台，已成功构建了一系列miRNA过表达稳定细胞系。从miRNA过表达载体构建、质粒转染或慢病毒转导靶细胞，到筛选和QPCR鉴定miRNA高表达的稳定细胞系，安必奇致力于为miRNA研究提供有力的科研工具。
- 2025年12月28日
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- 提供商：
北京安必奇生物
- 服务名称：
miRNA过表达稳定细胞系构建服务
MicroRNAs（miRNAs） 是一类长度为 19 ~ 25 个核苷酸（nt）的小单链非编码 RNA 分子，在RNA沉默和转录后基因表达调控中起作用，参与了许多重要的细胞过程，如细胞增殖、分化、凋亡、应激反应和肿瘤发生等。
miRNA首先在细胞核内转录出较长的初级miRNA（primary miRNA, pri-miRNA），然后在核内由Drosha复合物加工成60~70个核苷酸的发夹状RNA，即前体miRNA（precursor miRNA, pre-miRNA），在输出蛋白Exportin 5的帮助下被转运出核，在细胞质中被Dicer酶剪切形成19-25nt大小的成熟的miRNA，成熟的单链miRNA与类似RNA诱导沉默复合物（RISC）结合，通过与靶mRNA碱基完全或不完全配对结合，引起靶序列降解或抑制其翻译，从而对基因进行转录后的表达调控。
内源性miRNA的产生及其调控基因表达的机制（PIVA, R., 2013）
安必奇拥有成熟的稳定细胞系构建平台，已成功构建了一系列miRNA过表达稳定细胞系。从miRNA过表达载体构建、质粒转染或慢病毒转导靶细胞，到筛选和QPCR鉴定miRNA高表达的稳定细胞系，安必奇致力于为miRNA研究提供有力的科研工具。
应用领域
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miRNA功能研究
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靶基因表达水平验证：验证miRNA与靶基因之间的调控关系
我们的优势
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拥有成熟的稳定细胞系构建平台和很棒的科研团队，从设计到产品交付的整个过程都由经验丰富的专业人员管理
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严格的质量控制体系：细胞系无真菌、细菌和支原体污染
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覆盖已公布的人类、小鼠、大鼠数据库miRNA
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丰富的宿主细胞可供选择
客户提供信息
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miRNA序列信息
服务流程
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文献和实验、 miRNA靶基因的验证与miRNA靶基因 的预测方法相比，对miRNA靶基因进行实验验证的方法并不多，目前还没有一个快速、简便、高通量的鉴定方法。最直接的鉴定方法是， 利用荧光定量PCR及Westernblot方法分别检测转染或敲低miRNA后细胞中mRNA水平及蛋白水平的变化，从而确定miRNA与靶基因的对应关系。这种方法能够直接鉴定出miRNA的靶基因， 准确度高但不能鉴定miRNA的靶位点。转染或敲低miRNA：方式主要有两种，一种是构建miRNA过表达载体的稳定表达系统，一种是人工合成miRNA
一 miRNA成熟及作用方式（Mikhailidis DP, Athyros VG. Nat Rev Cardiol. 2014 Feb;11(2):72-4.） miRNA过表达：将miRNA前体序列构建入病毒载体中，该载体既可用于瞬时转染细胞，也可以包装成病毒用于稳定株筛选和动物水平过表达miRNA。 miRNA敲低：设计针对miRNA的TuD RNA封闭片段或海绵片段，再将该片段构建入病毒载体中。该载体除了可以直接瞬时转染细胞用于miRNA的敲低，也可以包装成慢病毒，用于动物水平敲低miRNA
物的培养物称为细胞株，也就是说，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。简而言之，细胞系概念强调细胞系是首次传代成功后的细胞群，细胞株概念强调细胞群的纯度，认为细胞株是克隆的结果。那再来说说，什么是稳定转染和瞬时转染。细胞：稳定转染，就是进入细胞的质粒整合入细胞基因组中，并能随细胞分裂稳定传递下去。瞬时转染表达时间短暂，外源基因导入整合基因组的几率非常低，绝大部分以游离形式存在，不能随细胞分裂而一同复制，导致最后拷贝数被稀释
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