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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
北京安必奇生物
- 服务名称:
组成型报告基因稳定细胞系
报告基因(Reporter Gene)稳定细胞系是将荧光蛋白基因或荧光素酶基因插入到宿主细胞基因组中,使其在细胞中长期表达。报告基因的表达可以分为组成型表达和诱导型表达。组成型报告基因稳定细胞系是以CMV、EF1a等组成型启动子驱动荧光蛋白或萤光素酶报告基因在宿主细胞中稳定表达,帮助科研人员在细胞水平和动物水平上对癌细胞的生长、侵袭、转移和再生等进行研究。
安必奇为您提供多种荧光蛋白(GFP、RFP、YFP等)或荧光素酶标记的稳定细胞系构建服务,迄今我们已经成功构建了涵盖多种细胞类型和报告基因的稳定细胞系,可以为您节省构建细胞系的时间,加速实验进程,以满足您不同的科研需求。
应用领域
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体外和体内成像:肿瘤细胞带有荧光蛋白或者荧光素酶标记,可以通过荧光显微镜或活体成像仪检测肿瘤细胞的生长,侵袭和转移情况
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细胞示踪:研究癌细胞的特性
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抗癌药物的筛选
我们的优势
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成熟的稳定细胞系构建平台和很棒的技术团队
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灵活的细胞系构建策略:脂质体转染法、电穿孔法和病毒转导法
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严格的质量控制体系:细胞系无真菌、细菌和支原体污染
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丰富的报告基因和宿主细胞类型
| 结直肠癌细胞 | 前列腺癌细胞 | 肺癌细胞 | 胃癌细胞 | 白血病/淋巴瘤/骨髓瘤细胞 |
| 胰腺癌细胞 | 膀胱癌细胞 | 乳腺癌细胞 | 宫颈癌细胞 | 卵巢癌细胞 |
| 肝癌细胞 | 皮肤癌细胞 | 肾癌细胞 | 中枢神经系统癌细胞 | 其他人源/鼠源肿瘤细胞 |
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文献和实验相关专题 1.G418的配制 : 方案一: 300mgG418加入3ml PBS 溶液,浓度为100mg/ml,完全溶解后,0.22um 过滤,-20℃保存。 方案二:(1)配制1M HEPES:23.8g HEPES(缓冲能力更强)粉末溶于100ml ddH2O,10N NaOH(加量较多)调节pH至7.3,过滤除菌 (较难过滤),4℃保存,终浓度为1mol/L。 (2)5g
进一步筛选,以确定最佳筛选浓度!心得:由于特性明确的细胞系G418的最佳用量还是比较稳定的,所以有时候不需要在这么大范围内进行筛选。比如说你要转染NIH3T3细胞,现在我告诉你我测试过NIH3T3细胞对G418的敏感性,我用的筛选浓度是200 ug/ml,这时你就可以做150ug/ml、200ug/ml、 300ug/ml三个浓度进行筛选。通过预实验确定了最佳筛选浓度后,就可以做稳定转染了。a 转染:转染后培养24小时或者更长,到细胞增长接近汇合时按1:4密度传代,继续培养,待细胞密度增至50
【求助】请问将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中,建立稳定的细胞系,用哪种转染方法比较好?中间有什么细节是值得注意的
lsdcfhyj 请教前辈,将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中,建立稳定的细胞系,用哪种转染方法比较好?中间有什么细节是值得注意的 chenjing198345 如果lab经费充裕的话可以用试剂盒包装慢病毒,然后感染真核细胞,完全按照protocol做就行,没啥特别的,sbi的kit不错。如果经费有限,一般是用磷酸钙转染法,这种方法在《分子克隆》里面有介绍,缓冲液的ph值很关键。 lsdcfhyj
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