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- 稳定表达细胞株指能够持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达的细胞。 稳定细胞株包括多克隆稳定细胞株和单克隆稳定细胞株。 吉玛基因在由质粒及慢病毒系统方法获得稳定细胞株上具有丰富的经验。
- 上海苏州
- 2026年04月22日
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- 提供商：
吉玛基因
- 服务名称：
稳定细胞系构建服务
- 规格：
株
稳定表达细胞株指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。在稳定细胞株中，目的基因整合到细胞染色体上，使细胞长期稳定表达该基因或持续干扰目的基因。
稳定细胞株包括多克隆稳定细胞株和单克隆稳定细胞株。慢病毒侵染目的细胞后，通过慢病毒介导的抗性基因，筛选得到细胞株是多个细胞克隆的组合，称为多克隆稳定细胞株；单克隆细胞株是从多克隆细胞中经单克隆化筛选得到的，是由一个细胞扩增得到的细胞株。单克隆细胞株性状统一，传代过程中细胞的基因表达能够保持稳定。
吉玛基因在由质粒及慢病毒系统方法获得稳定细胞株上具有丰富的经验，对于难转染的细胞系，通过电转法可以获得较高的转染效率。
二、服务流程：
1、载体构建
2、慢病毒包装
3、收获病毒液
4、病毒滴度测定
5、细胞筛选浓度测定→细胞接种→慢病毒侵染细胞株
6、筛选及检测
7、筛选结果鉴定
三、稳定细胞株筛选方法
- 质粒转染介导的稳定细胞系：基因过表达，如果转染效率达50%-70%，基因过表达基本满足实验需求。但是基因干扰实验对转染效率的要求较高，质粒转染的手段通常无法满足实验需求。另外，质粒在细胞中很快降解，最多维持72 h-96 h，无法满足较长时间的检测项目；质粒转染整合几率极低，稳定细胞株构建耗时耗力，且得率很低，往往需要挑取单克隆株。
- 病毒侵染筛选稳定细胞株：病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效，是目前主流的稳定细胞系筛选方法。用慢病毒侵染稳转细胞株，由于其高效整合、高效转录、高效表达、宿主范围广，感染效率高，且与细胞染色体整合而不发生基因重排，是制备稳定细胞株的理想载体。
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