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- 提供商:
北京安必奇生物
- 服务名称:
GPCR稳定细胞系构建服务
GPCR(G蛋白偶联受体),又称为7次跨膜受体,是细胞信号传导中的重要蛋白质,当膜外的配体作用于该受体时,该受体的膜内部分与G蛋白相互结合激活G蛋白,进而启动不同的信号转导通路参与多种生理和病理过程,如免疫调节、行为和情绪的调节、感觉的传递、内稳态的调节以及肿瘤的生长与转移等。G 蛋白偶联受体(GPCR)超家族包含约 600-1,000个靶标,是已知较大的一类具有治疗价值的分子靶标,目前世界药物市场上至少有三分之一的小分子药物是GPCR的激动剂或拮抗剂。GPCR过表达细胞系已广泛用于药物筛选和自身免疫性疾病的病因和发病机制研究。

GPCRs结构特征(Xiangli Qu,2020)
安必奇有多年稳定细胞系构建经验,可以为客户提供高品质的GPCR 稳定细胞系构建服务,用于药物活性筛选与评价以及疾病机制的研究,满足您在 GPCR 探索过程中的实验需求。
应用领域
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药物筛选:建立细胞水平药物筛选模型,并应用于高通量药物筛选研究
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疾病研究:用于GPCR相关疾病的机制研究
我们的优势
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成熟的稳定细胞系构建平台和很棒的科研团队
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灵活的细胞系构建策略:脂质体转染法、电穿孔法和病毒转导法
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严格的质量控制体系:细胞系无真菌、细菌和支原体污染
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涵盖人类、小鼠、大鼠和其他物种来源的大量 GPCR 靶标
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多种类型宿主细胞构建经验
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多种验证方法可供选择:qPCR、Western Blot、FACS,功能验证如cAMP、钙流、β-arrestin募集检测等
服务流程

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文献和实验-Pool KOUT 文库:全基因组敲除筛选。稳定株构建若涉及靶点可行性预判,可先用文库筛选或池化验证快速确认该基因是否为必需基因。 CRISPR-Pool SAM 文库:激活筛选文库,用于功能获得性研究;若筛选方向为激活而非敲除,宿主细胞需另行构建。 稳定细胞株构建服务 稳定株构建中工作量最大、最容易失败的是单克隆筛选环节。服务价值主要体现在: 并行处理大量克隆,缩短整体周期; 针对不同细胞系的克隆形成优化经验(条件培养基、分选方案); 池化效率预验证,避免在低效靶点上浪费时间; 交付经 NGS
相关专题 1.G418的配制 : 方案一: 300mgG418加入3ml PBS 溶液,浓度为100mg/ml,完全溶解后,0.22um 过滤,-20℃保存。 方案二:(1)配制1M HEPES:23.8g HEPES(缓冲能力更强)粉末溶于100ml ddH2O,10N NaOH(加量较多)调节pH至7.3,过滤除菌 (较难过滤),4℃保存,终浓度为1mol/L。 (2)5g
想长期表达某个基因,但它一高表达细胞就死、一过表达表型全是"中毒"——这时候很多老师会想到诱导表达系统: Tet 诱导稳定细胞株(Tet-On)怎么构建?和普通稳转株差在哪?诱导倍数怎么验证? 先说结论: Tet 诱导稳转株的核心是把"表达开关"装进稳转系统:细胞先稳定表达调控蛋白(Tet-On 的 rtTA),再引入由 TRE 应答元件控制的目的基因。平时不表达或低表达,加入诱导剂(多西环素 doxycycline)后才按剂量诱导表达。构建框架仍是"感染 → 筛选 → 验证 → 冻存
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