【转帖】教你一种简单、高效的提高重组蛋白质的诱导表达量的方法
相信如何提高目的重组蛋白的诱导表达量是很多同学在研究中都会遇到的问题。记得小编在读书的时候就经常在研究这个问题,泡了无数论坛,看了无数帖子,尝试过IPTG的诱导浓度、培养基成分、诱导温度、诱导时间,甚至让别的公司帮忙做密码子优化(将目的片段通过全基因合成的方式合成出来)。总的来说,提高IPTG浓度是可以提高目的蛋白的诱导表达量的,但一般也就用到1mM的浓度,再高对细胞有毒性; 培养基营养越丰富,表达量越高,所以如果追 ...
来源:丁香园论坛 8491 阅读
作为分子生物学领域老牌厂家,Promega同样有很有特色的原核表达系统,不过纵观Promega近年的表现,似乎不满足于此,而是将目光投向了跨物种间的穿梭表达,以及越来越热的体外表达系统了。蛋白纯化,永远是蛋白表达后最令人关注的问题。Promega的 PinPoint™ Xa 表达系统则是巧妙利用了生物素作为亲和纯化的中介――将目的基因克隆到表达载体上的一段“神秘&rdqu ...
来源:互联网 8469 阅读
比色杯比色杯也叫样品池,吸收器或比色皿,用来盛溶液,各个杯子壁厚度等规格应尽可能完全相等,否则将产生测定误差。玻璃比色杯只适用于可见光区,在紫外区测定时要用石英比色杯。不能用手指拿比色杯的光学面,用后要及时洗涤,可用温水或稀盐酸,乙醇以至铬酸洗液(浓酸中浸泡不要超过15分钟),表面只能用柔软的绒布或拭镜头纸擦净。比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸 ...
来源:丁香园论坛 8445 阅读
随着半干转印系统不断进步,有越来越多的方法被应用于加速转印过程。例如,用户可以通过更换转印缓冲液、使用不同的转印装置,或调整转印条件、修改实验设计,从而缩短实验时间。这些方法对需要快速得到结果并做出正确判断的用户非常有用,比如从事临床检验工作的用户。使用传统半干转印方法过去通常需要40〜60分钟完成一次转印,而现在通过使用快速缓冲液,Yrdimes®半干转印系统可以在7分钟之内完成蛋白质高效快速转印。Yrdim ...
来源:威泰克 8419 阅读