Western Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。深圳子科生物技术部主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、 原理与 Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二 ...
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各类western转膜条件
除了抗体原因,转膜是怕是western成败的最关键因素。看到园子里好多好多人在求助转膜时间,园子为何总结出一系列分子量蛋白转膜的时间呢?少说这对于大多数新手来说,是极好的礼物,说大点,借助丁香园的强势人气,此举可以提高我国一线科研人员WB水平也未必。我觉得好的转膜条件,WB的效率提高数倍不成问题。一起来看看站友们转膜条件的原创分享吧。蛋白来源:RAW264.7 总蛋白 ...
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献给初学者:western blot操作步骤2012版
蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被称为Western Blot。最开始做印迹的是一个叫Southern的科学家,但印迹的对象是DNA链,他把这种技术称为Southern blot,后来出现了两个过程相似,但是对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个对蛋白质,人们分别把这两种技术的称为Northern和We ...
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WB 过程中常见问题及建议大汇总
Western 免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。WB 实验中常会出现各种问题,迪申生物技术(上海)有限公司专注于生产免疫组化相关产品多年,对 WB 实验有一定了解,今天跟各位同学一起分享下 WB 实验中各种问题及应用对策。问题可能原因建议电泳条带成笑脸状胶不均匀冷切,中间冷却不好,电泳系统温度偏高减少电 ...
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