6种方法测定蛋白质含量

一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下： NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3SO2 +4H2O+NH3 (1)2NH3 +H2 SO4 ――(NH4 )2 SO4 (2) ...

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蛋白质泛素化检测

视频介绍了体外试管、体内培养细胞蛋白质泛素化的检测方法。该方法同样适用于其他类泛素化小分子修饰的检测，例如苏素化和neddylation。

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蛋白质浓度测定：紫外分光光度法

蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它们具有吸收紫外光的性质，其吸收高峰在280nm波长处，且在此波长内吸收峰的光密度值与其浓度成正比关系，故可作为蛋白质定量测定的依据，但由于各种蛋白质的酪氨酸和色氨酸的含量不同，故要准确定量，必需要有待测蛋白质的纯品作为标准来比较，或且已经知道其消光系数作为参考。另外，不少杂质在280nm波长下也有—定吸收能力，可能发生干扰。其中 ...

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蛋白定量Commassie法和BCA法比较

蛋白测定是在生命科学研究中最广泛应用的方法之一。在蛋白提纯，电泳，免疫分析，细胞生物，分子生物和其他研究应用时评估蛋白浓度是必需的。虽然目前有各种不同的蛋白测定方法，但仍然还没有一种测定方法被认为是广泛适合于所有的应用要求。每种方法都有它的优点和限制。一般来说，研究中经常需要用到一种以上的蛋白测定方法以排除一些未知的物质的干扰。大多数蛋白样品可通过比色测定法定量。在典型的蛋白测定中，化学试剂加 ...

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