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问
免疫磁珠分离细胞,是否要经过封闭?
西柚味的芋圆
一般不封闭吧,我是严格按照说明书的步骤来的,用的美天妮的磁珠分选,但是分选成功后,检测纯度的时候可以封闭
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问
分选CD4 CD8细胞之后死细胞太多了,有什么方法可以保护细胞的活性吗?
dxy_29k93ve4
分离细胞的时候可以加2% 的FBS,MACS分选的时候可以降到0.5% 给他一点营养,别让他饿着
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问
凋亡分析处理细胞时大部分细胞都处于pi坐标的负轴是什么原因?如何处理?
西柚味的芋圆
电压太低了,你做的时候一定要用单染管去调好电压
18 回答
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问
瞬时转染目的病毒及空载病毒测OD值的问题
西柚味的芋圆
肯定不会,,检测时的激发光的波长完全不一样,所以没有干扰
5 回答
748 围观
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问
Elisa中间接elisa和直接elisa到底是靠什么区别的?
西柚味的芋圆
直接法(direct ELISA) 将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。 优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。 缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。 间接法(indirect ELISA) 此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量
13 回答
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问
用冰冻切片做免疫荧光的抗体选择问题
颜渊溪桥
能做细胞免疫荧光的一般都可以,抗体上会写IF,但有时候抗体上不写也可以试试,但特异性很重要,要做好isotype对照
8 回答
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问
染色后发现 FITC 荧光全部在胞浆内是什么原因?如何进行实验步骤?
西柚味的芋圆
有的抗原收是膜抗原,比如说某些CD分子,但是,实验中发现,胞浆中也有,是不是因为该蛋白表达过程中,需要中胞浆转运到胞膜,所以,实验中发现胞浆中也有荧光
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问
石蜡切片的免疫组化,抗体只标明可做免疫印记,免疫荧光,是否可以做免疫酶技术?
西柚味的芋圆
Elisa应该是不行的,一般做wb的抗体我有尝试去做荧光和组化可以勉强做出来。但是很少很少可以用来做elisa
10 回答
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问
除了流式细胞仪pi法还有有哪些实验可以检测细胞周期?
西柚味的芋圆
好像有跟周期比较密切的一些蛋白,Ki67、PCNA可以看下
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问
怎样用流式细胞仪来鉴定小鼠BMDC?
西柚味的芋圆
这个BMDC是从小鼠骨髓冲洗出来的细胞,在体外用IL4和GM csf1刺激七天培养行成的细胞吗?单纯看纯度的话,我觉得 CD11c就可以了吧
8 回答
3277 围观
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问
Elisa标曲问题
西柚味的芋圆
你看一下试剂盒推荐用哪个拟合方式,不同的试剂盒会不同。可以直线,可以曲线的
9 回答
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问
抗体非还原胶显示多种状态,怎么判断活性占比,如何更好分离?
peaceful13
不同条带的区别主要是分子量大小的不同~想要的组分需要了解你的目标抗体的分子量大小通过marker的条带去确定该分子量位置,如果纯化效果不佳~可以考虑一下protein G
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1122 围观
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问
流式细胞周期模型 RMSD 值为什么这么大?
dxy_0mxazdaw
这个与你流式电压调的太大有关系。另一方面,加入的染料或者抗体浓度有可能过高,建议新买的抗体或者染料做一个梯度稀释,寻找到最合适的染色浓度。
6 回答
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问
病毒感染可以做MTT吗?
西柚味的芋圆
可以用cck8 做吖,做起来比较简单。就是加板子比较废眼睛。MTT也可以,但是没有CCk.8简单吧
9 回答
747 围观
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问
流式细胞术测不同浓度LPS刺激12h后RAW264.7 ,ROS 结果分析问题
西柚味的芋圆
你做这个的时候有没有用考虑到自发性荧光的影响。同时巨噬细胞类的检查需要先孵育Fc
9 回答
4359 围观
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问
关于小鼠肾脏冰冻切片直接免疫荧光问题1
西柚味的芋圆
当然需要罐洗,我一般用4百分之四的多聚甲醛进行罐柱
8 回答
787 围观
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问
免疫细胞化学检测采用SP法和SABC法的结果为什么不一致?
西柚味的芋圆
那只能重新检测一下标本,同时做俩种方法,确保所用的一抗识别同一克隆位点
7 回答
694 围观
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问
请问elisa实验中,空白、阳性对照、阴性对照均显色,可能是什么原因?
西柚味的芋圆
那肯定是你洗板子没有洗干净。或者你在加样的过程中导致标准品漏了
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703 围观
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问
将酶免疫技术中的间接法改为一步法合理么?
peaceful13
可以的~主要是一步法的检测灵敏度会比较低,
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8 回答
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问
流式细胞技术测定细胞内游离钙浓度为何要使用氯化钙?
peaceful13
主要为了保持缓冲液的钙离子浓度~避免影响最终实验结果,因为胞内外离子浓度差异较大~会快速引起钙离子的变化
7 回答
742 围观
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