免疫细胞化学检测采用SP法和SABC法的结果为什么不一致？
丁香实验
我用免疫组化方法检测细胞内survivin蛋白的表达。开始是用博士德的survivin抗体，博士德的免疫组化试剂盒（SABC）。检测的结果是在lovo人结肠癌细胞中survivin蛋白高表达。但是采用SP法来检测则得出相反的结果，DAB显色表现为survivin蛋白表达低（同样显色5分钟）。
我的操作过程：
4%多聚甲醛固定，h2o2－甲醇灭活内源性过氧化物酶，封闭，孵育一抗（survivin博士德，后来是用的santa公司的 1：500）。4度过夜；孵育相应二抗，孵育SP或SABC试剂，洗涤，DAB显色5分钟。
7 个回答
西柚味的芋圆
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那只能重新检测一下标本，同时做俩种方法，确保所用的一抗识别同一克隆位点
CXCR3
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建议使用同一个组织的样本，同时用两种方法标记，对比一下效果。
sk1981521
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两用方法的原理是一样的，SABC法比SP法多了第三部的一个放大作用，因此检测的敏感性要高一些
dxy_0mxazdaw
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这种情况需要你从自己的样本上找原因，建议你同时利用两种方法去检测同一批样本，以避免样本出现降解，存放时间太久或者污染等原因。
txs900416
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sabc法比sp法要灵敏，sp法hrp直接和亲和素连接的，sabc中是亲和素-生物素-hrp，sp法容易受空间位阻影响，灵敏度不如sabc
peaceful13
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主要应该是抗体的原因吧～抗体的克隆位点不同～得到的检测结果也会不太一样～
Timy最爱柠檬水
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1.确定抗体结合位点是否统一； 2.样本是否为同一来源；
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