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实验问答

30,775,211 科研人在看

问Chip 实验中，为什么input没有条带？ip跑出来位点不同？

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如果input没有结果，先检查样本本身是否可信，PCR反应条件/体系是否正确；然后才能进一步分析

3 回答4035 围观

问研究一种药物对细胞的凋亡，测量出ic50，后续处理细胞可以直接用ic50的浓度？

粥辰辰辰辰

后续直接用ic50的浓度是可以的

3 回答5780 围观

问[求助] 目的基因克隆进入pet28a载体是否在上游引物上要加ATG

dxy_xextz7w2

不需要，目的基因插入也是考载体本身启动翻译，跟目的基因本事无关，但是设计引物序列时要考虑插入的目的基因不能有移码突变

5 回答2028 围观

问蛋白组学研究的目的和内容是什么？与代谢组学结合可以探讨什么样的问题

此用户已注销

蛋白质组学是在组织、细胞的整体蛋白质水平上，探索蛋白质作用模式、功能机理、调节控制以及蛋白质群体内的相互关系，从而获得对疾病过程、细胞生理病理过程及调控网络的全面而深入的认识，以揭示生命活动的基本规律。代谢组学是是研究某一时刻细胞内所有代谢物的集合的一门学科。代谢组学主要研究的是作为各种代谢路径的底物和产物的小分子代谢物（MW<1000）。蛋白质组和代谢组能够分析得到在同一代谢通路中涉及到的

5 回答1893 围观

问毕赤酵母电转涂布到MD平板上，有些菌针尖大小就不长了，只有6个菌在继续生长？

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毕赤酵母在一些含葡萄糖较高的培养基中可以生长得很好。因此，可以考虑在含有一定葡萄糖浓度的MD培养基中进行毕赤酵母的培养和生长。你可以看看是否符合条件。

3 回答1435 围观

问做蛋白组学的标本有什么要求

此用户已注销

1、对于蛋白质溶液样本需提供溶剂的试剂成分；2、若样品中含有毒性或腐蚀性的物质，必须事先声明；3、一些病原性的微生物或具有侵染性的病变组织需进行灭活；4、用银染法进行蛋白胶染色时，应选择与质谱分析兼容的试剂，银染的样本不能进行脱色。综上可知，制备蛋白质质谱样品没有一个固定或统一的方法，应根据具体的实验目的和质谱分析的要求进行样本制备，在样本制备过程中应遵循准确记录、迅速低温的原则，最大限度的缩短样

5 回答1747 围观

问蛋白镍柱纯化后透析怎么选择透析液

此用户已注销

透析液的选择应该根据蛋白质的性质和实验要求而定，一般来说，可以选择与蛋白质缓冲液成分相同或相似的透析液。透析时间一般在2-4小时之间。更换透析液的时间也应该根据实验要求而定，一般建议在6-8小时和10-14小时（第二天早晨）更换透析液。

5 回答6678 围观

问细胞融合后为什么杂交瘤细胞无效价？

sswei

杂交瘤生成首先取决于宿主独特的免疫反应。因此，用于免疫的抗原需要引起强烈的体液反应，或者换句话说，它们需要具有免疫原性。并非所有抗原物质（蛋白质、小分子、脂质、碳水化合物、肽）都具有免疫原性。这种能力取决于抗原来源的生物体和用于产生杂交瘤的宿主生物体之间共有的同源性。

4 回答1331 围观

问LC3总是跑不出来，那个大佬能指点一下，任何步骤都是按要求来的，但就是没目的条带

sswei

多查查样本的表达情况和自噬情况。

4 回答2304 围观

问SPR分子互作技术的技术原理是什么？

静心观照

表面等离子共振（ SPR ）是借助传统光学现象，利用光在不同介质中产生消逝波后与等离子波产生共振，进而可以构建生物分子相互作用的生物传感分析技术，实时跟踪在天然状态下生物分子间的相互作用，用以检测生物传感芯片上配位体与分析物之间的相互作用情况。

9 回答2567 围观

问同源重组引物annealed bases要多少个？

土井挞克树

15-20这个范围还可以，超过30就不好p了

3 回答1795 围观

问有没有一种变量既是危险因素又是保护因素

土井挞克树

有的，有些变量在低浓度起危险饮食，高浓度起保护因素

4 回答1422 围观

问摇大肠杆菌菌液变绿是怎么回事？

balalaLy

很有可能是被其它细菌污染了，建议弃掉

4 回答2830 围观

问菌种保存与活化的问题

balalaLy

一般甘油浓度20-30%，-80度保存。

5 回答5201 围观

问黄嘌呤氧化酶实验-酶标法

小小翻车鱼

黄嘌呤氧化酶实验可以用于酶终止实验，用于评估酶活性、底物特异性、亲和力等因素。在黄嘌呤氧化酶实验中，黄嘌呤氧化酶可以作为酶的来源，而黄嘌呤（Xanthine）可以作为底物。以下是进行黄嘌呤氧化酶实验时需要注意的一些事项：1. 底物浓度：黄嘌呤氧化酶的活性通常与底物浓度呈正相关。因此，在实验中需要确保底物浓度适当，以便准确地评估酶活性。2. 温度和pH：黄嘌呤氧化酶在特定的温度和pH条件下活性最高。

3 回答2594 围观

问GC-MS衍生化样品非靶向检测数据如何分析

高山云初

GC-MS定量分析方法类似于色谱法定量分析，由GC-MS得到的总离子色谱图或质量色谱图，其色谱峰面积与相应组分的含量成正比，若对某一组份进行定量测定，可以采用色谱分析法中的归一化法、外标法、内标法等不同方法进行。这时，GC-MS法可理解为将质谱仪作为色谱仪检测器。其余均与色谱法相同，与色谱法定量不同的是，GC-MS法除了可利用总离子色谱图进行定量之外，还可利用质量色谱图进行定量，这样做可最大限度去

4 回答1692 围观

问请问蛋白质组学研究主要有哪些技术手段？主要的优缺点有哪些？

高山云初

主要分为四大类：第一类是凝胶和非凝胶的蛋白质组分离技术；第二类是基于生物质谱技术的蛋白质组学鉴定技术；第三类是蛋白质组学定量技术；第四类是基于生物信息学的蛋白质组学数据的分析处理技术。优缺点1. 蛋白质组学分离技术目前蛋白质组学常用的分离技术主要有两种类型：一是凝胶技术，主要包括双向凝胶电泳（Two-dimensional electrophoresis，2-DE）技术以及后来出现的双向荧光差异凝

8 回答3099 围观

问通过蛋白组学研究找到两组蛋白的差异蛋白

高山云初

蛋白组学是通过对生物体内蛋白质的研究来揭示其生物学功能及其与疾病之间的关系。在蛋白组学研究中，筛选差异蛋白是非常重要的一步。差异蛋白指的是在两组或多组样品中，表达量或修饰状态存在显著差异的蛋白质。通过筛选差异蛋白，我们可以了解不同生理状态或疾病状态下蛋白质表达的变化情况，从而为疾病的诊断、治疗和预防提供重要的信息。蛋白组学筛选差异蛋白的方法主要包括两维凝胶电泳、质谱分析、蛋白芯片等。

11 回答1512 围观

问请问用流式细胞仪测蚊子精子死亡率，样本怎么制备

小小翻车鱼

要使用流式细胞仪测蚊子的精子死亡率，可按照以下步骤制备样本：1. 收集样品：首先，从实验对象（雄蚊子）中收集精子样品。可以采用解剖法、吸管吸取法等方法收集雄蚊子的精液或精子。2. 离心沉淀：将收集到的精子样品进行离心，以使精子沉淀在管底。可以采用低速离心，如500g，离心时间为5-10分钟。3. 清洗精子：将沉淀的精子用适量的生理盐水或PBS（磷酸盐缓冲液）轻轻悬浮，然后用吸管小心地将上层液体吸去

3 回答587 围观

问请问一下各位大神我的EMSA为什么只有DNA的量在明显减少但是看不到DNA和蛋白的结合条带？

dxy_lpzs16a8

同学你好，请问你解决了吗？是什么原因呢？

2 回答1756 围观

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