• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        蛋白镍柱纯化后透析怎么选择透析液

        相关实验:蛋白纯化实验

        user-title

        Tar0

        用8M尿素提取的蛋白,过镍柱纯化后用200mM NaCl、20mM Tris-HCl、300mM的咪唑洗脱。后续透析的透析液应该用什么?

        wx-share
        分享

        5 个回答

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        透析液的选择应该根据蛋白质的性质和实验要求而定,一般来说,可以选择与蛋白质缓冲液成分相同或相似的透析液。

        透析时间一般在2-4小时之间。

        更换透析液的时间也应该根据实验要求而定,一般建议在6-8小时和10-14小时(第二天早晨)更换透析液。

        user-title

        sswei

        有帮助

        一般来说,可以选择与蛋白质缓冲液成分相同或相似的透析液。

        user-title

        小小翻车鱼

        有帮助

        在纯化过程之后,需要使用透析液对目标蛋白进行透析去除多余的盐分和咪唑。透析液的选择应该与目标蛋白的性质以及后续的实验方法相匹配。

        根据所述情况,建议使用以下透析液:

        1. PBS(磷酸盐缓冲液,pH 7.4):这是最常见的透析液,适用于许多蛋白质纯化后的透析处理。PBS具有较好的生物相容性,可以避免对目标蛋白的干扰。

        2. Tris-HCl缓冲液:如果您的目标蛋白对Tris-HCl缓冲液有较好的耐受性,可以考虑使用Tris-HCl缓冲液进行透析。例如,Tris-HCl(50 mM,pH 7.5)可能会是一个合适的选择。

        在实际操作中,建议使用透析袋或透析管进行透析。首先将目标蛋白溶液和透析液按一定比例(例如1:10至1:100)混合,然后将混合物放入透析袋或透析管中。将透析袋或透析管浸入一容器中的透析液,使液体充分交换,一般需要数小时至过夜。注意更换容器中的透析液以保持其新鲜。

        在透析过程中,请密切关注蛋白质浓度和活性,以确保目标蛋白的稳定性和功能不受影响。

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        纯化后的蛋白进行动物实验,需要去除咪唑,请问透析具体选择何种透析液,透析的时长以及透析液的更换时间

        user-title

        粥辰辰辰辰

        有帮助

        生物分子必须保存在严格的pH值控制条件下,以稳定其分子极性。典型的透析缓冲液pH范围为6-8。以下为常用的几种可以作为缓冲液的生化溶液:水,PBS,TBS,HEPES,氨基酸缓冲液。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序