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        关于多个质粒的共转染

        相关实验:质粒的制备

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        修勾炒圣子

        请问大家,目前有3个质粒需要稳转到某细胞株中,2个为逆转录病毒质粒可用包病毒方式转染,1个为普通质粒可用于脂质体转染,请问可以先用包病毒转染,再用脂质体转染吗(或先脂质体、再包病毒)?还是需要把这1个普通质粒改造为逆转录病毒质粒之后,再把3个逆转录质粒共转染到细胞中呢?谢谢!

         
         

         

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        3 个回答

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        loveliufudan

        有帮助


        对于需要转染3个质粒的情况,有以下建议:


        1. 原则上来说,可以先用逆转录病毒质粒包病毒转染,再用脂质体转染普通质粒,或者改变顺序先脂质体然后包病毒也都是可行的。


        2. 但是需要注意的是,两种转染方法转染效率可能存在差异,导致不同质粒的表达水平不一致。


        3. 如果要求3个质粒的转染效率和表达水平都较高且均匀,最好的方式还是把3个质粒都构建成逆转录病毒表达载体,然后同时转染。


        4. 因为逆转录病毒可以整合到宿主基因组中,避免质粒在细胞分割中丢失,所以通常转染效率更高,更适合长期稳定表达。


        5. 如果各质粒的表达水平要求不高,也可以先试试分步转染的方式,如果效果不佳再考虑统一为逆转录病毒质粒。


        6. 需要根据实验的具体要求,选择最优的转染策略。

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        先把这1个普通质粒改造为逆转录病毒质粒之后,再把3个逆转录质粒共转染到细胞中。

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        于小鱼鱼1998

        有帮助

        可以的,事实上也是先包病毒再脂质体成功率高一些

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