实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问石蜡包埋切片过程中，4%PFA浸泡组织的时间要求，至少24小时吗？

Topmicro

由你的试验目的决定，随着固定时间的延长对组织抗原的检出强度将逐渐降低，过度延长固定时间，易引起细胞内生物大分子过度交联。

5 回答839 围观

问请问小鼠带早起胚胎的子宫切片如何制作？

府宅

1.1取材成年雌性昆明小鼠，体重约30 g ，于傍晚与成熟雄性小鼠2:1合笼，次晨查见阴栓者定为孕第1天。于孕第6天下午3~4时颈椎脱白处死，剖腹取出双侧子宫角。呈结节状膨大处为胚胎植入部位。剪除子官系膜，但在近子宫处保留少许。用 PBS 冲洗两次，充分拉直后铺展在滤纸上，常规固定、冲洗。1.2包埋将固定好的组织依次放入70%、80%、90%、95%(2次）、100%(2次）酒精中脱水，各30mi

3 回答684 围观

问肿瘤球培养时间过长怎么办

bamboopiggy

按照你是哪种肿瘤，加入相应的生长因子进行刺激，一般肿瘤细胞长成球，大概要两周。

4 回答756 围观

问请问果汁有机酸含量测定和牛乳酸度的测定这两个实验那个更简单?

bamboopiggy

果汁有机酸含量测定，一般要用色谱，而牛乳酸度测定，可以直接用1N的NaOH，所以牛乳酸度测定简单

3 回答460 围观

问请问VIGS的靶位点选择和引物设计以及载体构建的原则和方法

bamboopiggy

如果是小白，建议参考文献里面人家用的是什么靶点，你直接拿来用就好。至于引物设计和载体构建，你们实验室如果做这个，直接问你师兄师姐可能会更合适。你也可以参考下面这个链接：http://www.360doc.com/content/21/1205/08/3843034_1007212833.shtml

3 回答2771 围观

问请问PEG的转化原理是什么？

bamboopiggy

PEG是细胞融合剂，可通过引起细胞膜表面电荷的紊乱，干扰细胞间的识别，从而有利于细胞间融合和外源DNA分子进入原生质体。

4 回答3116 围观

问神经生物学成像相关问题

bamboopiggy

使组织像玻璃一样透明，并将其放大到原始尺寸的数倍的技术，为研究生物系统内部机理提供了新途径。可以看请大脑中轴突和树突的蛇形回路

5 回答397 围观

问qpcr出现低置信区间等问题

bamboopiggy

1.你先确定你rna浓度够不够，逆转的效率如何？2.你操作过程中，所有东西都加全了？酶，引物，cDNA？3.你pcr程序是不是有问题？

2 回答391 围观

问显微镜成像相关的实验

bamboopiggy

普通的光学显微镜就可以，20x的放大，就看的很清楚，但是你如果要超清楚的，可以用共聚焦

3 回答437 围观

问 PBMCs 和NKp46 和 CD2 单抗的凝胶微珠共同孵育，激活 NK 加多少磁珠啊？与PBMC的比例能扩增多少倍啊

bamboopiggy

看你CD2单抗凝胶微珠的说明书，应该会有提示，如果没有，查文献看激活NK细胞，需要加入多少CD2单抗，然后换算一下就可以。

3 回答325 围观

问新冠抗原检测为何不能替代核酸检测

Topmicro

抗原检测灵敏度太低，虽然大大缩短了检测时间，但是容易出现假阴性的结果。

4 回答547 围观

问igG igM 抗体如何制备

dxy_gwrp7ndq

可以采用DEAE纤维素离子交换层析法或葡聚糖凝胶G-200分子筛滤层析，也可用ConA琼脂糖或PA琼脂糖特异性吸收

3 回答391 围观

问斑马鱼可以用来作为结膜炎的动物模型吗？

dxy_gwrp7ndq

可以作为结膜炎的动物模型，斑马鱼在眼睛形态、解剖结构、基因表达及功能等方面与人类存在极大的相似性,并且具有发育快、体外受精、胚胎透明、易于观察

3 回答401 围观

问有人会分离原代的外周血细胞吗？我想分离外周血细胞做为APC，我们实验室没有这个平台，请问分离这个需要什么，有什么注意事项呀？

bamboopiggy

可以用肝素抗凝血，加入淋巴细胞分离液，梯度离心法提取单个核细胞，作为apc

2 回答469 围观

问细胞培养时，国产血清会不会影响细胞生长活力

Topmicro

看细胞类型，做实验室可以用国产血清和进口血清做个对比，毕竟从便捷程度和经费预算来看国产血清有优势。

3 回答376 围观

问CT值在40以上的时候，是否可靠

Topmicro

一般不可靠，你做实验的时候要加入纯水做阴性对照，对结果的判定也要比较样品ct值和阴性对照的ct值。

4 回答833 围观

问最近要做体外抗炎，请问大家有哪些细胞模型吗？

Topmicro

3 回答2438 围观

问为什么重组载体会出现多了一段His标签的情况

Topmicro

应该是你设计引物的时候认为添加的his-tag，建议你查一下原始试验记录看看。

3 回答371 围观

问如何保证所选的是处女蝇？f1代果蝇未处理干净为什么会影响实验结果？

府宅

刚羽化的果蝇翅膀还没有展开，整齐折叠在两侧，呈蓝灰色。在2小时内，翅膀会逐渐展开，并与身体保持微小的角度。而在果蝇腹部的左侧，我们可以看见一个小黑斑，这个小黑斑就是处女蝇的标志

3 回答686 围观

问蜱组织伊红染色1s着色，酒精洗不掉，蒸馏水浸泡也不褪色。

bamboopiggy

1.降低一下伊红的浓度。2.用盐酸乙醇洗就会褪色。

3 回答554 围观

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