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问
小细胞肺癌悬浮细胞养不起来
bamboopiggy
是不是半贴壁,但是不用胰酶消化,用枪一吹就起来了?这样也可以,不一定非要纯悬浮。
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问
细胞传代培养的操作步骤和注意事项?
摸鱼第一名
DMSO是肯定要去除的,其实问题就是DMSO该怎么处理,主要有两种处理方式,一种是加多倍体积的完全培养基稀释,目的是减少再次离心对细胞的影响。另一种就是漂洗后再次离心,目的是尽可能去除DMSO。感觉我附近前者使用较多。
7 回答
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问
细胞贴壁和什么有关?为啥细胞不贴壁呢?如何促进细胞贴壁?
bamboopiggy
这个和细胞的状态有很大关系,你可以弄点促贴壁试剂,先处理一下你的孔板,再放细胞
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问
coip蛋白降解,怎么办?
bamboopiggy
1.注意冰上操作 2.加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂
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问
构建过表达或者敲除细胞株,药物筛选后如何挑取单克隆细胞?
bamboopiggy
可以用梯度稀释法,将细胞稀释后,加入96孔板,找那些有一个细胞的孔,标记好。就可以
3 回答
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问
关于细胞传代的问题?
bamboopiggy
六代,因为可传代数,指的是细胞总共可以传多少代,你可以在4代的时候,多冻点,每次复苏只能用6代。
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问
大神们,请问这是真菌污染吗
未来9
感觉不像是污染,有点像细胞成团了
4 回答
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问
核酸斑点杂交,只有中间一列显色很深,是说明其他的探针灵敏度不行吗还是显色剂用量不够。
bamboopiggy
可能是探针灵敏度不够,显色剂是一起加的,别的地方有显色,就不是显色剂的问题。
1 回答
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问
细胞培养有一个团块,是污染吗
bamboopiggy
不是污染,是你细胞密度太大了,没有传代,形成的细胞团,直接吸出来就可以
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问
细胞培养时怀疑是支原体污染
bamboopiggy
支原体用显微镜是看不到的,用pcr的方法可以检测,你可从网上搜搜引物。
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问
复苏第三天的PC12细胞,请问这是染菌了吗?
bamboopiggy
是你的血清不好,细胞状态差,分泌的颗粒,没有染菌
3 回答
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问
为什么我的细胞会长成这样一条线,求助!
bamboopiggy
因为你在操作过程中,把皿底划伤了,所以沿着你划的线长
3 回答
1504 围观
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问
细胞培养铺96孔板时老是不均匀
bamboopiggy
96孔板没法晃匀的,你要在铺之前,混匀,铺进去以后不要在动了
3 回答
1078 围观
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问
淋巴细胞培养一般选用哪种培养液
未来9
可用作淋巴细胞染色体培养的培养液很 多,各实验室的使用情况也略有所异
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问
为什么同样的植物不同人提的DNA,相同的引物,相同的体系,相同的PCR时间温度,跑电泳跑出来有长有短,6,7,8,9长度不正确?
天一湖医者
考虑引物特异性较差或者模板不纯(包括降解以及掺有别的DNA序列)如果用PCR产物做模板的话,量太大也会有这个现象,另外胶没煮好也会这样。
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问
HepG2传代之后形态正确吗
Topmicro
你的HepG2细胞形态没有问题,传代之前和传代之后出现形态差异还是很常见的,除了HepG2外像HT-29细胞在前一两代为球形后边会长成像黏膜组织的形态,这都是正常的。
4 回答
1215 围观
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问
分别收集EGF刺激0分钟、5、10、30分钟的1841乳腺癌细胞,提取蛋白质,分别进行酶解,然后采用iTEAQ中的不同核素标记。
天一湖医者
采用iTRAQ试剂中的114Da、115Da、116Da和117Da不同同位素标记。将它们等量混合,采用抗泛酪氨酸磷酸化抗体进行免疫沉淀,再经过固相金属亲和层析(Im¬mobilizedmetalaffinitychromatography,IMAC)进一步纯化,最后用LC-MS/MS。
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问
小鼠肠蛋白,dapdh,想问下背景深和蛋白形状为啥不规则?
子雨环
我的情况类似,自检多法,借相似蛋白跑跑还有注意下封闭的问题。供参考
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问
氟苯尼考粉和恩诺沙星粉用什么溶剂溶解
dxy_gwrp7ndq
可以使用二甲亚砜作为溶剂溶解。
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问
如何看QRT-PCR 结果中的Cq值?
丁香实验
新版的软件都叫Cq值,不叫Ct值了,不必理会。Ct值15-25是最好,10-30之间也接受。如果超过30了,得看一下复孔是否一致,如果一致,也接受。如果不一致,基本就是废的。
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