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        为什么浓缩胶和分离胶的电压不一致?同样的电压可以吗?

        相关实验:顽拗性植物组织的蛋白质组学研究(苯酚法提取蛋白质)实验

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        辰辰9658

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        4 个回答

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        bamboopiggy

        有帮助

        可以一样的电压,电压不一样,是想在浓缩胶中,将蛋白压成一条线,所以想让蛋白走的慢,在分离胶中,是为了把条带分开,这时候用低电压,其实也是可以的,就是时间太长。

        user-title

        Topmicro

        有帮助

        浓缩胶电压低可以使样品集中到同一水平线上,所以如果浓缩胶和分离胶同样保持低电压的话是完全没有问题的,只是会浪费时间。

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        天一湖医者

        有帮助

        PH值不同,前者主要表现为浓缩效用,后者表现为电荷效用和分子筛效用.
        浓缩效应主要在浓缩胶中完成,浓缩胶的pH6.8
        ,在这个pH条件下,缓冲液中的HCl的Cl离子几乎全部解离,
        Gly的等电点为

        6.0

        ,仅少数解离为负离子,在电场中移动速度很慢.酸性蛋白质在此pH下解离为负离子,三类离子的迁移速率为Cl一般蛋白质Gly

        ,电泳开始后,Cl离子泳动快,在其后留下一个低离子浓度区.
        Gly在电场中移动很慢,造成移动离子的缺乏,于是快慢离子间就形成了一个缺少离子的高压区,在高压区内所有的负离子都会加速移动,当移到Cl离子区域时,高电压消失,蛋白质的移动速度慢下来,当以上稳定状态建立后,蛋白质样品在快慢离子间被浓缩形成一个狭小的之间层,并按蛋白质所带负电荷量的多少依次排列成带,浓缩样品,从浓缩胶进入分离胶后,胶的pH升高,
        Gly的离解度增大,泳动率上升,又因为它分子小,故超过所有的蛋白质分子,紧跟在Cl离子后,Cl离子迁移后,低离子浓度不再存在,形成了恒定的电场强度,因此,蛋白质样品在分离胶中的分离主要取决于它的电荷性质,分子大小和形状,分离胶的孔径有一定大小,对不同相对质量的蛋白质来说,通过时收到的滞阻作用不同,即使静电荷相等的颗粒,也会由于这种分子筛的效应,把不同大小的蛋白质相互分开.

        user-title

        未来9

        有帮助

        浓缩胶的目的使得loading 的样品能够在同一条水平线上进入分离胶 ,如果电压太大前端的蛋白容易在后面的蛋白赶上来前进入分离胶。而在分离是理论上(实际上也是)小电压长时间分离的效果会更好,但是在操作过程中没有必要等那么长的时间,所以就用大电压快点跑。

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