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问
请教各位大神,这个图要如何解读?尤其是左上的DAPI染色?
bamboopiggy
每个图上标的蛋白的颜色,和图中染的颜色是一致的,感觉你这俩蛋白在胞浆,没有和dapi重叠,但是你这俩蛋白可以共定位
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问
小胶质细胞好用的marker
天一湖医者
小胶质细胞常用好用的marker
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问
想问下细胞突然变得不好消化了是什么原因
bamboopiggy
1.可能是你养的时间太长了,细胞一层叠一层,不是单层了,所以胰酶难消化。2,可能胰酶失效了。
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问
慢病毒转染细胞的构建筛选
bamboopiggy
嘌呤霉素筛的还是比较快的,一般1-2周就可以了。主要看细胞状态。
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问
细胞复苏传代后养变形了是怎么回事?
Topmicro
细胞复苏传代后变形很正常,像ht-29细胞传代之后可能会长成像上皮组织的形态。
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问
小鼠免疫细胞的获取与计数该怎么写?
天一湖医者
免疫细胞的计数 (一)荧光抗体染色 应用范围广泛,可分别使用于B细胞、T细胞及其亚类、MФ及NK细胞的计数及表面标记的测定,多选用间接荧光抗体染色,即活细胞与其特异性单抗作用后再与荧光抗球蛋白抗体反应,经荧光显微镜观察可见膜荧光。 (二)花环形成试验 T细胞与B细胞皆可应用该试验进行计数。计数T细胞的方法称E花环形成试验(erythrocyte rosette formingcell
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问
THP1这种悬浮细胞如何进行基因敲除?如何挑单克隆?
bamboopiggy
THP1 最好用电转,用病毒都不一定能进去。敲完以后,你可以用流式做单细胞打板就可以
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问
怎样拯救污染了的细胞,培养过夜的细胞有黑色点。
bamboopiggy
如果能有替代,尽量扔掉,否则可是试试加各种你能弄到的抗生素,尤其是两性霉素B吧。
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问
细胞冻存传代多久一次比较适合?
异乡人hyq
原代分离的细胞最好在3代以内,如果是无限传代细胞无所谓。
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问
a549老化,触角多,如何改善?
bamboopiggy
a549是永生化的,不是老化,是你血清不好,所以才有触角
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问
有方法可以确定细胞大概传了多少代吗?一般极限是多少
bamboopiggy
最好同一波实验,用相差不超过5代的细胞做。这样结果比较可靠
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问
小细胞肺癌悬浮细胞养不起来
bamboopiggy
是不是半贴壁,但是不用胰酶消化,用枪一吹就起来了?这样也可以,不一定非要纯悬浮。
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问
细胞传代培养的操作步骤和注意事项?
摸鱼第一名
DMSO是肯定要去除的,其实问题就是DMSO该怎么处理,主要有两种处理方式,一种是加多倍体积的完全培养基稀释,目的是减少再次离心对细胞的影响。另一种就是漂洗后再次离心,目的是尽可能去除DMSO。感觉我附近前者使用较多。
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问
细胞贴壁和什么有关?为啥细胞不贴壁呢?如何促进细胞贴壁?
bamboopiggy
这个和细胞的状态有很大关系,你可以弄点促贴壁试剂,先处理一下你的孔板,再放细胞
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问
coip蛋白降解,怎么办?
bamboopiggy
1.注意冰上操作 2.加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂
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问
蛋白表达量不高是什么原因?
Topmicro
蛋白表达量不高的原因有很多,比如表达用载体是否合理?培养液是否需要优化?
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问
构建过表达或者敲除细胞株,药物筛选后如何挑取单克隆细胞?
bamboopiggy
可以用梯度稀释法,将细胞稀释后,加入96孔板,找那些有一个细胞的孔,标记好。就可以
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问
核酸斑点杂交,只有中间一列显色很深,是说明其他的探针灵敏度不行吗还是显色剂用量不够。
bamboopiggy
可能是探针灵敏度不够,显色剂是一起加的,别的地方有显色,就不是显色剂的问题。
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问
淋巴细胞培养一般选用哪种培养液
未来9
可用作淋巴细胞染色体培养的培养液很 多,各实验室的使用情况也略有所异
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问
如何看QRT-PCR 结果中的Cq值?
丁香实验
新版的软件都叫Cq值,不叫Ct值了,不必理会。Ct值15-25是最好,10-30之间也接受。如果超过30了,得看一下复孔是否一致,如果一致,也接受。如果不一致,基本就是废的。
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