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        细胞培养需要注意哪些细节?

        相关实验:巢式 PCR

        user-title

        ZIWENHUA

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        5 个回答

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        异乡人hyq

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        在细胞培养过程中,除了细胞本身的生长特性,环境也会影响细胞的状态。1:细胞生长的附着物或支持物性质(如:细胞培养瓶/板或细胞培养载体);2:细胞培养基的理化性质和成分;3:气相成分;4:培养温度等。合适的培养环境才可以使细胞表现出特定的功能。

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        Topmicro

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        培养液、血清的品牌尽量固定,操作过程中注意别污染,按时传代,如果是贴壁细胞使用胰酶消化时间别过长。

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        bamboopiggy

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        1.注意规范操作 2,要有无菌观念 3,养着细胞,至少要每天看一次。

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        天一湖医者

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        第一、从液氮罐中拿出冻存管时要做好防护工作,特别是避免液氮溅到眼睛里,有条件的实验室可以配备防冻手套和护目镜;

        第二、取出的冻存管要先确认管内没有液氮,再放入37度水浴锅,有液氮的情况下很容易因为管内压强突然增大而导致冻存管炸裂,轻则细胞无法使用,重则伤及实验人员;

        第三、融化过程中要不断轻轻摇晃冻存管,使其尽快融化,但摇晃程度要把握得当,不能让水浴锅中的水渗进冻存管中;

        第四、离心的具体转速和时间视细胞而定,通常难养的细胞需要降低转速,缩短时间,以减少离心对细胞的伤害;

        第五、部分对离心敏感的细胞(主要是原代细胞)可以采用融化后不离心,直接重悬后补足培养基培养,待其贴壁后再换液去掉冻存液中DMSO的方式处理;

        第六、如果冻存细胞量不多,可以在冻存管盖上标注离心方向,以便确定离心后细胞团位置,吸去上清时调整冻存管角度,使细胞团位于最下方,可以尽量减少细胞损失。

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        未来9

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        细胞培养需注意:

        (1)预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热;

        (2)用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手;

        (3)正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且减少污染;

        (4)点燃酒精灯:注意火焰不能太小;

        (5)严格的无菌操作;

        (6)贴壁细胞消化适度:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化;

        (7)传代细胞所有的操作尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作,每种细胞使用一套器材。避免交叉感染;

        (8)传代细胞瓶口每次打开或者关闭都需要在酒精灯上消毒。

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