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问
制备小鼠胸腺细胞悬液时,加入1 %伊红-Y 染液后,为什么有时候细胞死亡过多?
Eason老歌迷
大多数情况都是你的样本质量有问题,如果是培养的细胞,一般都是培养时间过长,或者是因为你的实验手段导致细胞死亡。
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问
计数不同种类的白细胞时,用Giemsa染液染色时,染色不均匀时或者染色有沉淀是因为什么?怎么解决?
天一湖医者
Giemsa 染色,可提供对比强烈的多色性的染色,但沉淀出的染料,使细胞看起来呈斑点状。由于氧化原因,在染液表面形成沉淀, 当加入水时,在整个溶液中,特别是在载玻片的表面上形成浮渣,冲洗染液时通过向上提升液面,而不是倒出液体或取出栽载玻片,在最后步骤,为防止细胞和浮渣接触,彻底冲洗以便去掉留在制备物中的浮渣。
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问
用lipo2000转染细胞是否需要换液,提取蛋白转染时间24h够吗?需不需要培养48-72h?
bamboopiggy
lipo2000毒性大,需要换液,提蛋白最好48h以后
3 回答
3893 围观
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问
细胞培养过程中,总是不容易贴壁,怎么弄呢
大草原的小灰驴
具体培养的是什么细胞呢?先查一下相关文献,对此类细胞的培养条件、保存条件,然后确认一下细胞来源是否可靠,保存条件是否符合等。如果还找不到问题,那就看看培养基的各个成分有无失效或者过期的,培养箱的温湿度是否在控。
6 回答
428 围观
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问
我的CHX(用DMSO溶的)实验是0 2 4 6h,请问对照的DMSO应该在什么时候加呢?
bamboopiggy
可以在一开始的时候就加上,然后和6h的一起收。因为DMSO单纯应该是不起作用的,时间就按最长的来。
2 回答
3008 围观
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问
请问悬浮细胞如果做transwell 测细胞的迁移能力?如果按照贴壁细胞的做法,悬浮细胞会附着在小室下层膜么,会不会直接掉落?
府宅
会掉落,也会附着。由于某些细胞自身的原因或某些膜的关系,有时细胞在穿过膜后不能附着在膜上,而是掉进下室
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问
血管内皮细胞在培养的时候一般都用什么培养基呢?
dxy_gwrp7ndq
可以用cascade biologics的Medium 200培养基
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问
有什么评价瞬转效率的方法吗(质粒进入细胞的多少)?而不是瞬转后蛋白表达效率。
bamboopiggy
转个带荧光的空质粒,可以根据荧光的强度,来判断瞬转的效率。
4 回答
1838 围观
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问
慢病毒感染293S悬浮细胞,感染效率低,有什么提高感染效率的方法吗?除了离心
bamboopiggy
提高一下病毒浓度试试,可以用PEG8000来浓缩病毒。
5 回答
794 围观
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问
流水细胞中细胞死亡有点多?
bamboopiggy
可能使细胞浓度低,通过的速度太快,对细胞损伤大,最好提高一下细胞浓度,或降低一些通过速度,
4 回答
574 围观
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问
流式细胞分选速度如何确定?
bamboopiggy
这主要取决于要求通过的细胞的数目,如果你的细胞密度高,就可以降低一下速度,细胞密度低,就要加速,对细胞损伤就大一些。
5 回答
1249 围观
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问
观察变移上皮时,用高倍镜观察的时候,基底层、中层细胞及表层细胞分界不明显怎么办?
师医生说
移形上皮细胞一般属于鳞柱交界,表层细胞呈立方形或椭圆形,体积较大,中层细胞为多边形,基底层细胞多为矮柱状或立方形。另外,在染色后是需要观察,细胞边缘的着色和厚度的。中层细胞多着色不均匀,基底层细胞染色最深,而且是边缘较厚!表层细胞多层裙边样。
3 回答
871 围观
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问
细胞太少涨不起来怎么办
美丽的天使GHX
多加点血清。2.有多加点同样细胞,3.加点那个细胞培养贵过的上清。
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1699 围观
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问
远志对小鼠的祛痰作用机制是什么,为什么是灌胃而不是注射
bamboopiggy
远志中含有丰富的植物皂甙,这种物质可以作用于能胃粘膜,刺激胃粘液的分泌,引起患者产生轻度恶心的感。 呕吐感形成以后,就刺激支气管产生连锁反应,分泌更多的物质来祛痰,所以对于痰多不化的人去,有较好的改善作用。所以这个玩意,要刺激胃黏膜,需要灌胃
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1926 围观
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问
慢病毒文库感染293T细胞,怎么确定MOI=0.3?
bamboopiggy
MOI的计算方法:MOI值=病毒滴度(TU/mL)×病毒体积(mL)/细胞个数,你可以调整病毒的加入体积和细胞的个数,使MOI=0.3
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9516 围观
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问
慢病毒稳转293细胞后,有的细胞会变大,有空泡状,是什么原因呢?
bamboopiggy
慢病毒对293细胞是有影响的,如果变大的细胞,和空泡的细胞不多,那就不用管,如果细胞数目多,需要降低加入病毒的浓度。
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问
fed batch过程中细胞数过多怎么降低细胞数提高活率
dxy_gwrp7ndq
可以适当提高补料渗透压,减缓细胞生长
3 回答
1532 围观
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问
ana-1细胞污染,培养液浑浊变黄,求助挽救办法
雲深何跡
大概率挽救不了了,建议更换新的试剂和耗材
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771 围观
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问
细胞荧光染色法显示结果这样了,跟之前的不一样了,怎么处理啊
天一湖医者
或者是因为你的细胞不纯,比如转染了你目的基因的表达质粒。
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问
C2C12细胞分化的时候每次肌管分化的都不是很好,而且方向很杂乱,是什么问题啊?然后分化培养基中马血清浓度怎么选择啊各位大佬?
bamboopiggy
将1×105个细胞接种于6孔板,待细胞密度达80-90%时开始更换为成肌肉诱导培养基:含2%马血清、10µg/ml胰岛素的DMEM培养基,隔天换液,于诱导后5天,可见细胞分化成多核的肌纤维--这是我师姐用的方法。
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