细胞传代后鉴定细胞的稳定

一般情况下细胞生长至完全汇合后就应该传代，所有细胞生长都有一个要求不宜生长过密(也就是常说的长老了)，但有接触抑制的细胞，在汇合前就必须进行传代，这类细胞一般在密度70-80%就进行传代，否则会引起细胞分化。

可以5-10代做一次测序。

4倍看密度，10倍看状态，细胞长到覆盖80-90%即可传代，不要长的过密才传，那时细胞状态已经不太好了。

细胞传代的方式，如果你在培养瓶里养的话，加入约1ml胰蛋白酶放于培养箱中消化1-2min（不同细胞消化时间及程度不同，此为多数细胞消化时间），取出后看到瓶底细胞开始脱落而未完全脱落（可在显微镜下观察，也可用手轻轻拍打瓶壁），立即加入约5ml含有FBS的培养基终止消化，并轻轻吹打瓶底至细胞全脱落，后移入离心管进行离心，弃除上清，加入新的含FBS的培养基，轻轻吹打均匀，分装至几个新的培养瓶中继续培养。

一般建议选择代数相近的细胞完成实验，一般传5-10代，就会有变异，如果想确定，可以每5-10代，去做一次rna-seq