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问
质粒过表达,CMV启动子转录起始位点是什么?细胞内转录出的mRNA有5'UTR吗?
天一湖医者
启动子一般位于转录起始位点的上游。启动子位于结构基因5'端上游的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。
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问
人心肌细胞系都有哪些?怎么选择 人的心肌细胞怎么分离
天一湖医者
一类是普通的心肌细胞,包括心房肌和心室肌,含有丰富的肌原纤维,执行收缩功能,故又称为工作细胞。另一类是一些特殊分化了的心肌细胞,组成心脏的特殊传导系统;其中主要包括P细胞和浦肯野细胞,它们除了具有兴奋性和传导性之外,还具有自动产生节律性、兴奋的能力,故称为自律细胞,
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问
Tunel凋亡和双染测凋亡有什么本质差别吗?
Eason老歌迷
双染法特异性高,简单易行。tunel灵敏度高,但是成本高。最好是配合着用
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问
有哪些多重免疫组化技术平台?哪个比较常用?
天一湖医者
上海阿克曼医学检验所(阿克曼病理)佰诺全景分析技术平台等
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问
使用caspase 3/7检测细胞凋亡,为什么正常培养的细胞,荧光值也非常常高?
bamboopiggy
因为细胞状态可能会有自发荧光,你设好对照组,圈门就可以
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问
慢病毒文库感染后,多长时间第一次收取细胞,作为基线?
bamboopiggy
一般感染起作用要48-72h,你可以48h收第一次
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问
远志对小鼠的化痰作用实验中,为什么要严格控制给药到处死小鼠然后插气管的时间呀?
天一湖医者
因为灌胃给药时间过长会出现死亡或者身体消瘦、精神萎靡等症状。
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问
CO—IP实验组背景脏,看不清条带,有什么优化办法么?
bamboopiggy
你的total input呢?是不是wb的抗体不好使,检测不到
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问
co—ip可以用beads+裂解液来做IgG么?
bamboopiggy
不能,igG是阴性对照,要排除抗体的重链轻链的影响。以及非特异性结合
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问
请问肿瘤悬浮细胞,最近开始变形长伪足,换了培养基跟血清,我怀疑gibco血清是假的,有所好转,培养基血清会导致细胞这样么?为什么
Eason老歌迷
换了培养基和血清,有所好转,那说明还是和这两个因素有关……
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问
怎么判断细胞是否染菌
未来9
只能根据经验去判断,细胞内出现小泡越来越多,细胞间有黑点布朗运动,细胞崩解,生长受限。
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问
MTT测药物对细胞的毒性,测的OD值必须在0-0.7范围内吗?
未来9
一般合适的OD值是在0.1-0.7之间,一般大于1可能就不会不准了
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问
固相免疫分析时,捕获蛋白的免疫分析的亲和力可以通过哪种方式增加,怎么增加实验中蛋白的结合率?
bamboopiggy
找到合适的ph值,找到合适的蛋白浓度,做好预实验,
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问
用放射性碘标记抗原,131和125I与化合物结合时怎么尽可能增加碘化效率,怎么增加被标记蛋白质的活性?
天一湖医者
第一,要尽量保持产物的天然结构,避免使用过于剧烈的手段纯化,如避免使用有机溶剂,SDS,尿素等使蛋白质变性的物质,尽量在低温下进行分离纯化,也要避免产生过多的泡末,避免过度搅拌。第二,要尽量提高其纯度。
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问
PANC-1细胞为什么看上去长不满
半糖奇朵
可以调整下培养基血清的配比,或者查一下权威文献中该细胞系的培养方法
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问
我想请问一下怎么找到我做的抗体有几种亚型呢?
BelleK1EH
1.建议从研究相关文献资料中寻找抗体亚型相关资料2.也可以去相关厂家网站寻找
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问
固相抗体是怎么形成的?
bamboopiggy
将抗体连接在固相载体上,形成固相抗体。其实就是按你抗体的载体是什么
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问
细胞提取rna跑胶条带太暗,还有弥散条带怎么办
Eason老歌迷
扩增杂带?解决办法:退火温度提高,延伸时间缩短,混合样品时放冰上,尽量别对着样品说话,以免污染样品。
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问
请问大神们,悬浮细胞,卵巢肿瘤的悬浮细胞,细胞以前偶尔会出现变形但很少,最近细胞变形很多,请问这种变形的原因是什么?怎样避免?
未来9
一般培养的悬浮细胞的确容易出现这个情况。1.从复苏细胞开始,要了解细胞的生长周期,尤其是出现指数生长期的时间段。尽量将细胞控制在一个合理的培养阶段,不要贪图省力贸然将细胞培养密度调小,或者认为过一个周末多个半天不处理也没有关系;除非你已经做过生长周期的确认;2.有些悬浮细胞在平面培养环境中,会贴服在培养表面,虽然不会像贴壁细胞一样,但也不容易飘起来,但是在不断传代中会出现贴壁越来越差的情况,这个时
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问
请问碱性尿素缓冲液如何配制,PH值应该为多少?
bamboopiggy
先配缓冲液:8.95g磷酸氢二钠,3.4g磷酸二氢钾溶于水,并定容至1000ml,然后再加入30g尿素,因为尿素缓冲液pH值为6.83.可以加NaOH调至7.0
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