半糖奇朵
实验过程为:10cm整皿细胞,+1ml裂解液(RIPA+PMSF)裂解,高速离心取上清500ul,BCA定量后,用裂解液稀释至1ug/ul,取500ul+30ul A/G珠子孵育60min,离心后留上清,加IP抗体5ul,4℃孵育过夜,第二天加20ulA/G珠子,4℃孵育4h,现配裂解液洗珠子5次后上样
bamboopiggy
你的total input呢?是不是wb的抗体不好使,检测不到
天一湖医者
实验仪器或液体被污染。使用洁净的仪器或液体。转移膜上的非特异吸附导致背景高。
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