我要登录|
免费注册
|
我的丁香通
- 企业机构：
- 成为企业机构
- 个人用户：
- 个人中心
移动端

大家都在搜

0 人通过求购买到了急需的产品

免费发布求购

发布求购

实验问答

31,951,876 科研人在看

问蛋白条带有点弥散，这种情况怎么解决

bamboopiggy

没事，这样就可以用，条带还是很好的

3 回答2204 围观

问细胞冻存推荐密度是多少？如何配置所需冻存液

Eason老歌迷

冻存液的大致的配置方法：冻存液=10% DMSO + 90% FBS。但是呢，这个比例，各个实验室都是不一样的，因人而异吧推荐细胞数100-300万／ml

4 回答7747 围观

问MTT的OD值有的说要在0.1-0.7，有的说要在0.8-1.2之间，到底要在什么范围呀，求指导！

bamboopiggy

这个只要能说明你实验的问题，没有必要太纠结，差不多0.5-1.0就可以

3 回答3293 围观

问问一下，机器显影同一张wb膜，加显影液使得显影液铺满膜后需一不需要把膜上多余液体吸干

bamboopiggy

对，要把多余液体吸掉，但是不能吸干，膜要是湿的

2 回答753 围观

问临床组织标本冻存已久（半年以上），还能做PCR吗？

天一湖医者

基本上不可能成功了。mRNA都降解完了。要做RT-PCR应该尽量选择新鲜的组织材料，即使保存，也要-80°，而且时间不要太长，最多几天吧。

3 回答1749 围观

问拟南芥T3代悬浮细胞，第九天显微镜镜检全部死亡了，温度和光照自己摇床速率都是正常的，本人第一次养细胞，想问下大家这是什么原因呢？

Eason老歌迷

别着急，遇到这种情况，先观察一下细胞的形态，来大致判断一下是什么原因导致的。如果培养基变黄，可能是营养不足，需要你及时更换。同时也可能是细胞污染，主要是细菌污染，支原体污染，黑胶虫污染，病毒污染等，

1 回答363 围观

问如何从细胞形态学上准备判断细胞是否已经老化了。

Eason老歌迷

可以使用细胞衰老检测办法。每张片子镜下计数四百个细胞，确定X-Gal染色阳性细胞（衰老细胞）在细胞群体中的所占的百分比即衰老细胞率（蓝染细胞数/总计细胞数×100%）。即可算出。

4 回答1604 围观

问细胞支原体污染如何治疗与预防

Eason老歌迷

如何避免支原体污染:首先肯定是要做好细胞间消毒，确保操作时没有污染，做到正确操作，确保你的细胞培养操作器械无菌，可以在培养基中加入适量抗生素。出现支原体污染该如何应对:对于非重要的细胞，如培养中的细胞、WCB的细胞等，将培养物与用过的培养基灭活后丢弃即可。比较重要的细胞，用清洗纯化法清除支原体污染。

4 回答711 围观

问细胞不贴壁，怀疑是血清的问题，更换血清后，效果依然不好，还可能是什么原因导致的？

Eason老歌迷

细胞不贴壁有很多种原因导致的，你可以从多个角度来看。比如说是不是胰蛋白酶消化过多啊？是不是存在细胞污染，比如说支原体污染啊。或者你的培养基的问题，培养基pH值过碱；还有接种细胞起始浓度太低或太高啊。等等都可能引起

4 回答697 围观

问在对细胞进行梯度给药给药时，母液是用水配的，浓度过低，那么在用培养基稀释药物时，细胞最低能接受稀释多少倍才能保证渗透压不受影响？

Eason老歌迷

这个要自己先算好浓度，稀释时可以用培养基，加多少量自己一定要算好。绝大多数细胞对渗透压有一定耐受性。就拿人的来说吧，人的血浆渗透压约为290mOsm/kg, 可视为培养人体细胞的理想渗透压。而对比来看，鼠细胞渗透压则是在320mOsm/kg左右。对于大多数哺乳动物细胞，渗透压在260－320mOsm/kg的范围都适宜。

3 回答754 围观

问细胞培养过程中，细胞周围包括细胞上有很多小黑点，怎么办?

Eason老歌迷

看到有小黑点，可以这样做:先要用肉眼去观察培养基是不是混浊。然后在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是不是能游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

3 回答730 围观

问病料存放旧后测rna数值偏差大是操作不当还是污染可能性大？

迟C迟

样品放久了测OD不准，可能是RNA已经降解了，测出来估计是污染了。

3 回答609 围观

问HEK293细胞或CHO-K1细胞在摇瓶培养

Eason老歌迷

第一，换液时动作要轻。第二，293细胞在低代时容易贴壁，生长良好，在传到几十代以后，易聚集成团，且贴壁不牢，用PBS冲洗时即可能脱落，即使消化后也不容易吹打成单细胞悬液。第三，刚复苏的293贴壁很慢，复苏接种后24小时内,应尽量减少观察细胞次数或不作观察,以免因晃动而影响细胞贴壁。复苏后48小时左右观察贴壁情况并进行首次更换培养基比较合适。

4 回答919 围观

问请问养细胞过程中受到真菌污染该怎么处理？

迟C迟

CO2孵箱被真菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用无气味杀孢子剂擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把杀孢子剂喷洒成雾状，使其蒸汽弥漫。待杀孢子剂的气雾消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防真菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制真菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制真菌素或放

4 回答1393 围观

问转染时细胞总是死的太多，而且细胞状态不好，形态也发生了变化，请问你们转染时细胞铺板会铺多少细胞呢？可以根据类型提供一下参考嘛？

bamboopiggy

看你用哪种转染试剂，按照转染试剂说明书推荐剂量进行操作

2 回答1378 围观

问猪肺原代肺巨噬细胞生长速度比较慢，贴壁效果不好怎么办

Eason老歌迷

细胞生长速度慢的解决办法:增加起始培养细胞浓度；换入新鲜配制培养液；补加生长因子；血清需要保存在5℃到20℃，培养液需在2-8℃避光保存；含血清培养液在2-8℃保存，并在2周内用完；要轻轻吹打消化细胞；分离培养物，检测支原体；比较新培养液与原培养液成分，让细胞逐渐适应新培养液。细胞不贴壁:细胞的传代最重要的是胰酶处理时间：消化不够细胞本身就是成团的；若胰酶处理太久，容易造成细胞膜蛋白损伤，使细胞贴

5 回答912 围观

问iPS细胞在复苏培养的过程中容易遇到的问题有哪些？

天一湖医者

培养细胞不贴壁？悬浮细胞成簇？原代细胞培养物污染？培养细胞死亡等问题。

3 回答1189 围观

问最近好几次Western blot出来的结果不满意，怎么办呢？

丁冉1234

有可能是曝光液时间久了失效或是条带上沾了太多的曝光液

8 回答836 围观

问求助，如何判断细胞的对数生长期

天一湖医者

判断细胞是否处于对数生长期的方法：1. 细胞汇合度达到70%-80%时基本上是出于对数期，在显微镜下一观察就可以。 2. 做生长曲线一作图。3. 细胞计数，养上几个孔的细胞，每隔1-2天消化一个孔的细胞下来用台盼蓝染色血球计数板计数。4. 如果是简单的判断一下，要搞清楚细胞生长的不同时期，刚开始细胞生长一般是悬浮的，后来贴壁生长，直到生长到长满瓶底80%时间都是对数期。细胞的对数生长期：对数

4 回答14207 围观

问外周血淋巴细胞染色体实验中，分裂相极少的原因？

bamboopiggy

不是试剂的问题，就是淋巴细胞收集的问题，淋巴细胞的量要够

4 回答1512 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

领取干货资料

反馈

TOP

打开小程序