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问
图示为70分子量的marker位置 膜上有但没有显影,目标蛋白分子量是75也没有显影,这个目标以前做过显影出来过。请问是为什么
whilt-shirt
检查一下一抗二抗是否正确,建议重新配制新的一抗二抗
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问
大鼠三叉神经节在什么位置?
dxywode
你可以参考一下文献,希望对你有帮助。
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问
酵母双杂涂二缺板不长是什么原因呢?
bamboopiggy
大问题可能是两个蛋白不互作。小问题是:有可能转化过程有问题。质粒质量不好。培养基有问题,酵母感受态不好
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问
DNA的检测结果可以通过外界(如药物)进行人为干预吗?
dxywode
可以的,通过研究人类的DNA,对可能发生的疾病进行提前预知,研发出个性化的DNA药物,可以让人类延长生命。
5 回答
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问
请问这几个蛋白质pull down结果该怎么看呢?
bamboopiggy
pull down的wb结果,其中input指的是whole lysate的上样,然后用s-protein 做pull down,图B说明ASAP和ATP5A可以相互作用。C说命ASAP和ATP5C可以相互作用。 然后用asap做IP,可以拉下atp5a和atp5c来。都是为了说明他们能相互作用SFB指的是SFB标签=S-tag, Flag-tag, and SBP-tag 融合到一起MBP指的的
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问
求含有8M盐酸胍的样品如何跑SDS-Page
bamboopiggy
需要通过把样品从8M盐酸胍中复性,然后纯化,然后再跑SDS-Page
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问
体外转录,转录酶结合在DNA双链的哪条链上,怎么判断是以那一条连作为模版?
Eason老歌迷
RNA聚合酶上σ 亚基与启动子上特定区域的特异性结合,或者说启动子上特定的序列,就决定了哪一条是模板链。
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问
用质粒克隆某一DN片段,我我不明白,两端是如何终止的?
bamboopiggy
终止于您的primer binding的位置,没有引物结合,就无法扩增。
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问
体外转录,模版DNA必须是双链吗,单链DNA可以作为模版吗?
bamboopiggy
单链DNA可以作为模板,但是起始必须是双链。DNA模板必须包含噬菌体聚合酶结合并开始RNA合成所需的双链启动子区域。转录模板包括经克隆构建的质粒、基于RNA前体进行第一链及第二链合成(例如aRNA扩增)得到的cDNA模板,以及通过PCR方法或对化学合成的寡核苷酸进行退火所得到的线性模板等。在设计转录模板时,必须确定需要的是正义链还是反义链转录本。若RNA是要用作与信使RNA杂交的探针(例如:Nor
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问
菌液pcr检测重组质粒跑出来条带很弥散,是怎么回事,胶没问题
bamboopiggy
菌落pcr 条带弥散没什么,因为菌落里很多杂七杂八的东西,只要你要的目的条带能出现就可以。或者也可能是你的buffer,或者是胶配的不匀,感觉你的marker也有点弥散
5 回答
3656 围观
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问
细胞膜上有很多蛋白质,如何鉴定膜转运蛋白?(亲和标记 膜重建)
whilt-shirt
可以采用荧光标记或者His探针试试
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676 围观
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问
在质粒的双酶切以及回收中,为什么DNA的甲基化程度会影响核酸限制性内切酶的活性?
未来9
DNA甲基化以后,就不再被限制性内切酶识别和切割。
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1987 围观
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问
在Assay中选择Absolute Quantification后,溶解曲线怎么设置呢?
bamboopiggy
绝对定量是适合需要测定靶点实际拷贝数的研究人员采用 的实时荧光定量 PCR 分析方法。要进行绝对定量,需对 已知浓度的目标模板溶液进行几次连续稀释,采用实时荧 光定量 PCR 扩增,利用获得的数据生成标准曲线,标准 曲线以各靶点浓度及相应的 Ct 值绘制。然后将未知样本 的 Ct 值与此标准曲线进行比较,确定其拷贝数。而溶解曲线是看引物特不特异的,按照常用的方法设置就好。①快速升温至 95℃,将反
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问
请问这个pull down结果图怎么看
bamboopiggy
没看到图,全靠猜了,应该是在293T中过表达了ASAP以及ATP5A、5C,然后用抗体互相拉,证明他们之间有相互结合。至于里面写total input的,是全细胞裂解液,293T细胞中,这几个基因过表达成功。至于用293T细胞,是因为293是一个各种蛋白表达量都比较高的工具细胞。
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1362 围观
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问
请问胶的边缘为什么会弯,下次如何避免
未来9
会不会是有点漏胶玻璃板要洗干净,注意固定好玻璃板
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问
人体异种移植性肿瘤移植过程中如果出现针头刺伤会不会转移到自己体内?
balalaLy
正常来讲人体的免疫系统会把带入人体的肿瘤细胞杀死,裸鼠成瘤的一个原理也是因为裸鼠的免疫缺陷特征。不过凡事都有例外,做实验保护自己和周边人最重要,出了问题尽快上报老板,该就医的就医。
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597 围观
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问
image j的Fiji版本电脑使用不了是为什么?
天一湖医者
可能的原因是文件的路径包含中文名称
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1752 围观
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问
用Heochst33342直接染色如何看细胞是否发生凋亡
bamboopiggy
图二发生凋亡,Heochst33342染色后,直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染
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3695 围观
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问
在对细胞株进行敲低时,设置多组敲低序列是排除脱靶效应(off-target effect)么?如果没有做多组敲低,应该怎么弥补?
balalaLy
赶紧补呗,常规都是做三组,确保有两组以上能用。
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问
细胞IF,共聚焦显微镜相同参数观察对照组实验组的细胞基本都染上颜色了 只是对照组的亮度明显比实验组暗,请问亮度区别如何统计学分析
bamboopiggy
你用的共聚焦的电脑上应该有数据处理的软件,读出灰度值,就可以。
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