细胞真菌污染怎么避免，如果已经污染了，通过pbs洗有用么

一般实验室细胞间不会出现真菌污染，可以通过及时消毒细胞间来避免 也可以通过添加万古霉素来预防，如果已经发生了真菌污染，孢子会散落在培养液中，用PBS清洗没用

细胞操作时要注意无菌操作，如果真菌污染了，可以试着用PBS反复多次洗，但是效果不大，建议重新复苏

规范操作是第一位的，如果真的污染了，并且还有备份的情况下，不建议用pbs洗，直接拿出细胞间进行无害化处理。否则可以尝试加两性霉素B试试

1.用DBSS洗细胞(稀释污染物):

对于单层细胞,用DBSS浸洗培养物3次,胰蛋白酶消化,通过离心重悬用DBSS再洗细胞2次;

对于悬浮细胞,通过离心重悬用DBSS洗培养物5次。

2.在新培养瓶以最低可行种植密度再接种。

3.加入高浓度抗生素培养基,每2天换液。(一般在正常工作浓度的5-10倍,建议做梯度实验确保对污染物杀伤力较大,对细胞影响较小)

真菌污染预防方法：

1)，将细胞移出来，用微量硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里加适量硫酸铜或者酸氢二钠高盐液体防止霉菌

2)孵箱应定期清洁，大约一个月左右清洁一次，

3)可在培养基里加两性霉素或制霉菌素)或[放线菌素D或双抗进行预防。

4)最主要的还是要培养良好的无菌观念，实验室尽量不要大声说话，佩戴好口罩，手套，操作时应小心，避免培养基撒入培养箱以及生物安全柜，这些撒入培养箱的培养基为细菌及真菌的繁殖提供了很好的条件。

如果污染了，推荐倒去培养上清（悬浮的就算了～～），用100－150ml的无菌PBS冲洗N遍，大概差不多20次，镜下观测不到真菌个体为准。然后将细胞消化，离心，重新稀释种板，24孔就可以了，然后过两到三天，会有部分孔长菌，剩下的不长的，接种到新的环境下，就可以了